凡纳滨对虾引进群体与养殖群体遗传多样性的AFLP分析.PDFVIP

文章编号: 1000-0615(2017)03-0339-08 DOI: 10.11964/jfc.20140709398 凡纳滨对虾引进群体与养殖群体遗传多样性的AFLP分析 叶 宁， 包秀凤， 刘建勇* (广东海洋大学水产学院，湛江市海洋生态与养殖环境重点实验室，广东 湛江 524088) 摘要：为了解引进群体与国内养殖凡纳滨对虾群体遗传多样性水平，提高我国凡纳滨对 虾种质改良效果，应用AFLP标记技术对国外引进群体和国内养殖凡纳滨对虾群体的遗 传多样性进行分析。采用7对AFLP引物组合对7个群体 (4个引进群体，3个养殖群体 ) 210个个体进行扩增，结果发现，7个群体在100~500 bp共检测到105个位点，其中多态性 位点为90个，多态位点比例为85.71%。4个引进群体(KONABA、SISMAN、OI、CHAI)的 多态性位点百分率分别为62.5%，57.29%，61.21%，61.46%；3个国内养殖群体(ZX、 ZK、GDOU)的多态性位点百分率分别为65.63%，61.46%，54.17%。7个群体的平均期望 杂合度为0.202，表明所检测的7个群体均具有较高的遗传多样性。AMOVA分析显示， 51.79%的变异来源于群体间，群体的平均ΦST值为0.518，表明凡纳滨对虾群体内遗传多 样性非常丰富，群体间相似性较大，且存在较强的基因交流。本研究可为我国凡纳滨对 虾种质改良提供基础资料。 关键词: 凡纳滨对虾；遗传多样性；遗传差异；扩增片段长度多态性 中图分类号: Q 347；S 917.4 文献标志码: A 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)具有肉质 鲜美、对水环境因子的变化适应能力强及便于 运输等优点，是在中国占绝对优势的养殖对虾 品种[1]。但由于科学良种选育和保种技术体系缺乏、 病害检验检疫的松懈和累代养殖等导致我国多 代养殖的凡纳滨对虾种质退化严重，表现为生 长缓慢、病害高发及规格参差不齐等现象，这 对我国对虾养殖业的经济效益及可持续发展造 成了严重的影响 [1-2]。引进原种或改良现有养殖 品种是恢复和优化凡纳滨对虾种质的有效途径， 在品种选育过程中，必须在掌握群体遗传背景 的基础上，才能充分利用杂种优势加快育种进 程，所以在制定选育计划的同时，应及时评估 已有群体的遗传资源现状[3]。 扩增片段长度多态性 (amplified fragment length polymorphism, AFLP)技术是1992年荷兰科 学家Vos等 [4]发明的以DNA双酶切位点为多样性 分析基础的分子生物学技术。AFLP具有信息量 大、灵敏度高和多态性丰富及无需了解基因组 序列信息等优点，可以利用少量引物检测到大 量的有效位点进行分析[5]。目前，利用AFLP标记 技术，已初步构建了中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)[6]、虾夷扇贝(Mizuhopecten yessoensis)[7] 和太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)[8]等的遗传连锁 图谱，颉晓勇等 [9]、薛姝雯等 [10]和王豪杰等 [11] 分别对凡纳滨对虾6个不同群体、不同家系和4个 不同世代群体的遗传多样性进行了评估，均验 证了AFLP标记技术是一种研究群体间遗传多样 性非常有效的工具。本实验运用AFLP标记技术 分析和探讨了凡纳滨对虾引进群体与国内养殖 群体的遗传多样性及遗传差异，从分子水平上 比较了引进群体与国内养殖群体的遗传变异 情况，为下一步凡纳滨对虾种质改良提供基础 数据。 第41 卷 第 3 期 水 产 学 报 Vol. 41, No. 3 2017 年 3 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Mar., 2017 收稿日期：2014-08-05 修回日期：2015-11-26 资助项目：广东省科技计划(2010B020201014)；广东省海洋与渔业局海洋渔业推广专项(A200899E04，A201001H05，A201101B05) 通信作者：刘建勇，E-mail：liujy70@126.com 1 材料与方法 1.1 实验材料 实验材料来源于湛江市海威水产养殖有限 公司，收集于2013年6—8月，包括4个凡纳滨对 虾引进群体[科纳湾群体(KONABA)、迈阿密群 体(SISMAM)、夏威夷群体(OI)、泰国正大群体 (CHAI)]和国内3个养殖群体 [中科一号(ZHONGKE No. 1，简称ZK)、中兴一号(ZHONGXING No.1， 简称ZX)、广东海洋大学遗传育种中心(GDOU)]， 从7个群体中各随机选取30尾，共210尾，取虾尾 肌肉于无水