固态发酵生产微生物脂肪酶_汪小锋.pdf

中国生物工程杂志 Ch ina B iotechno logy, 2009, 29( 1) : 105~ 110 固态发酵生产微生物脂肪酶 * 汪小锋 闫云君 ** (华中科技大学生命科学技术学院教育部分子生物物理重点实验室 武汉 430074 ) 摘要 脂肪酶在水相和非水相中都具有催化活性,在众多工业领域应用前景十分广阔。但脂肪酶的 生产成本仍然过高,限制了其在某些工业领域的大规模使用。固体发酵因具有设备比较简单、能耗 低、成本低、对环境危害小、易于推广等诸多优点, 已逐渐成为微生物脂肪酶生产的一个重要方式。 由于能源成本的抬高和人们环保意识的加强,自上世纪 90年代以来,原来一直认为技术含量较低的 固态发酵技术重新受到重视并得到了快速的发展。综述了固态发酵在脂肪酶生产中的应用研究,重 点介绍了固态发酵生产脂肪酶的特点、脂肪酶固态发酵的影响因素及其生物反应器。 关键词 固态发酵 脂肪酶 基质 生物反应器 中图分类号 Q55 收稿日期: 2008-09-10 修回日期: 2008-09-25 * 国 家 863 计 划 ( 2006AA020203, 2007AA05Z417, 2007AA100703 )、教育部新世纪优秀人才基金 ( NCET-07-0336 )、武 汉市攻关 ( 200720422138)资助项目 ** 通讯作者,电子信箱: yanyun jun@ tom. com 脂肪酶 ( EC 3. 1. 1. 3 )是一类特殊的酯键水解酶, 广泛存在于动物组织、植物种子及微生物中, 能在油水 界面上催化脂类物质分解、合成和酯交换反应。作为 重要的工业用酶,脂肪酶在食品、制革、饲料、洗涤、油 酯化工等传统工业领域应用十分广泛 [ 1] ,在生物能源 (生物柴油 )、有机合成、药物手性拆分和工具酶等新领 域的应用前景也十分广阔 [ 2] 。微生物脂肪酶种类多, 作用温度及 pH 值范围比动植物脂肪酶广,底物专一性 高,且便于工业生产以获得较高纯度的酶制剂, 已成为 工业生产脂肪酶的主要来源。 微生物脂肪酶生产有传统固态发酵 [ 3] 、液态发 酵 [4] 和细胞固定化 [ 5] 等方法。目前生产上常采用液体 深层培养法生产脂肪酶。作为节约生产成本的连续发 酵、固定化细胞发酵和固态发酵技术在脂肪酶生产中 也有较多成功实例。液体深层培养易于控制, 不易染 杂菌,生产效率高,但分离纯化成本高,且会产生大量 污水。固体发酵能耗低、环境危害小, 随着能源成本的 抬高和人们环保意识的增强,原来一直认为技术含量 较低的传统固态发酵技术在最近 20年内重新得到重 视。另外,固体发酵还具有设备比较简单、成本低、易 于推广等优点,已成功实现了工业酶 (淀粉酶、纤维素 酶、木聚糖酶、蛋白酶、肌醇六磷酸酶和脂肪酶等 )、有 机酸 (柠檬酸、乳酸等 )和次生代谢产物 (赤霉酸、麦角 碱、抗生素等 )的商业化生产 [ 6] 。随着固态发酵过程放 大技术、固态发酵数学模型以及固态发酵生物反应器 的发展,固态发酵技术将在酶制剂的发酵生产中扮演 着更为重要的角色。本文综述了脂肪酶固态发酵技术 的最新研究进展。 1 固态发酵生产脂肪酶的特点 固体基质发酵 ( solid substrates fermentation, SSF )广 义的定义是指一切使用不溶性固体基质来培养微生物的 工艺过程。固态发酵生产脂肪酶的微生物很多,大多数 是 真 菌, 如 Penicillium simplicissimum, Pen icillium verrucosum, Pen icillium restrictum, Pen icillium candidum, Rhizopus homotha llicu s, Rhizopus rhizopod iform is, Rhizopus oligosporu s, Rh izopus ch inensis, Rhizomucor pusillu s, A sperg illu s f lavu s, A sperg illu s niger, Cand ida rugosa, Yeast lipolytica 等, 部 分 细 菌 如 Burkholderia cepacia , P seudom onas aeruginosa, Bacillu s coagu lans等也可以采用 固态发酵方式生产脂肪酶。与液态深层发酵 ( submerged fermen tat ions, SmF)相比,它具有以下优点 [7] : ( 1)培养基 简单且来源广泛,多为便宜的天然基质或工农业生产的 下脚料; ( 2)投资少、能耗低、技术较简单; ( 3 )产物的产 中国生物工程杂志 China B io techno logy V