肺炎支原体检测培养基培训资料(瑞凯)详解.ppt

肺炎型支原体药敏检测培养基 陕西瑞凯生物科技有限公司 研发单位：第四军医大学生 产 商：瑞凯生物科技 资质： 什么是支原体 支原体是一种介于细菌和病毒之间，无细胞壁的最小病原微生物。比细菌小，比病毒大，可通过滤菌器，显微镜下观察不到。 支原体的大小为0.2—0.3um,无细胞壁，不能维持固定形态而呈多边形。没有细胞壁，因此对影响细胞壁合成的抗生素，如头孢类，青霉素类不敏感。 对热抵抗力差，通常55摄氏度经15分钟处理可使之灭活，因此应严格控制培养温度在37摄氏度。 繁殖所需物质特殊，所以许多培养基培养时间长。因此更适合支原体繁殖的物质及配合比例，就显得尤为重要，同时也是不同培养基的主要技术区别所在。 支原体的分类： 1.自然界目前已经发现的150多种； 2.与人有关的（人类能感染的）： 人型支原体（MH）、解脲支原体（UU）、肺炎支原体（MP）、生殖支原体（MG） 显微镜下观察肺炎支原体 肺炎支原体传播途径及发病率 1.通过呼吸道飞沫传染； 2.可散发流行； 3.全年均可发病； 4.易感染的人群儿童，青少年； 5.发病率：由支原体引起的感冒占整个感冒20%-40%，支原体肺炎的发病率可占所有肺炎病例的30%-40%。 引起感冒的几种原因及检测与治疗 细菌感染，可通过检查血常规，测定白细胞，中性粒细胞高低来判断。１小时出结果。头孢类，青霉素类抗生素。 病毒感染，通过血常规，测定淋巴细胞高低来判断。１小时出结果。无特效药，用解热镇痛来缓解，靠免疫力。 肺炎支原体感染。大环内酯类抗生素（破坏细胞中蛋白质合成） 1 血清学检测，也称抗体检测，检测患者血液中是否存在支原体抗体。２－３小时出结果。目前普遍采用。 2ｐｃｒ检测，依靠大型设备，手段繁琐，无临床价值，目前只做科研使用。 ３传统培养法　直接查病原体，所需时间长，但准确率高。 肺炎支原体几种检测方法对比 1：血清学检测（抗体检测），3小时出结果是指抗体产生后经3小时检验，但从人感染支原体到体内产生抗体需要5－７天，且治愈后抗体在体内衰退仍需１－３月。所以说无论什么时间做抗体检测结果都不准确。 ２：传统培养法，直接查患者体内病原体，准确率高，但所需时间长（４８－７２小时）。 ３：瑞凯培养法，准确率高，直接提取患者咽部分泌物查病原体，发病前2-3天就能查到，培养时间短２４小时报结果。 目前医院检查肺炎支原体常用手段及治疗 常用抗体检测，患者由于时间问题未产生抗体时，靠经验用药，３天后，如无缓解再测抗体，产生后换药治疗。联合用药，增加患者负担，造成滥用抗生素。抽血检测患者痛苦，易造成交叉感染。操作时采样，血清离心繁杂费时费力。 瑞凯培养法检测的临床意义 直接查病原体，发病前２－３天就可在呼吸道分泌物中发现肺炎支原体，实现早期发现，快速正确诊断，及时治疗。 根据患者病情各异，指导正确用药。 避免滥用抗生素，减少患者负担。 无需采血，减少患者痛苦及恐怖心里。 肺炎型支原体药敏检测培养基的作用机理 药敏板制备 药敏板内分别包备11种不同浓度的抗生素，Ａ１－１１为低浓度，Ｂ１－１１为高浓度。１２ＡＢ两孔未包备。 肺炎支原体药敏检测培养基的使用步骤 常温下使培养基解冻，滴加50ul到药敏板12号A孔，再加50ul石蜡油封盖以防挥发。 用无菌棉拭子（或咽拭子）在口腔咽部捻转数次取出棉拭子置于培养瓶内，搅动数次，对着瓶壁尽量挤压出其中液体，然后取出棉拭子弃之。 移液器将接种后的培养基分别滴加到药敏实验板除阴性对照孔外的23个小孔内，每孔50ul，然后每孔再加50ul的液体石蜡。 将药敏板连同培养瓶内剩余培养基放置37°C恒温箱培养24小时。 结 果 判 断 阳性判断：A:培养瓶和药敏板的12号A孔培养基应保持原来的红色，如果变黄操作过程可能出现问题，建议放弃本次试验。B:培养瓶和药敏板的12号B孔保持原来的红色为阴性，变黄判定为阳性。 药敏判断：标本判定阳性后再分别观察1~11号孔，如果A、B两孔均呈黄色说明肺炎支原体对该抗生素耐药。A孔呈黄色，B孔保持红色，则是中度敏感；如果A、B两孔均保持原来的红色则肺炎支原体对该抗生素敏感。 注 意 事 项 1：培养液-4°C至-15°C冷 冻保存，不能反复解冻。 2：取样位置准确，取样 量足。 3：取样后在10分钟 内接种到培养基。 4：37°C恒温。 解答大家关心比较多的问题： 1.采样部位： 咽喉部位 （舌腭弓、 悬雍垂、 扁桃体） 2.采样方法： A.棉拭子浸润生理 盐水后并挤压出棉 拭子液体采样更佳； B.捻转数次，粘取 尽量多（没有具体 量值）的分泌液； C.棉拭子压住舌 根部，令患者咬住 30秒左右取出。 3.采样后，咽拭子能放置多久？ 我