- 1、本文档共17页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
《诊断学》 第一节 基因诊断
1
第一节 基因诊断
分子生物学是当前生命科学中发展最快并正在与其他学
科广泛交叉与渗透的重前沿领域。近年来分子生物学理论和
技术不断应用于临床,在疾病的诊断、治疗和预防等方面发
挥了重要的作用,并显示出了无限的潜力。分子生物学与临
床医学的广泛交叉和渗透就产生了分子医学。20 世纪 70 年代
末,美国科学家 Kan 等首次应用 DNA 分子杂交技术成功地对
镰形细胞贫血症进行了基因诊断,这标志着基因诊断的开始。
一、基因诊断的含义
基因诊断是在基因水平上对疾病或人体的状态进行诊断。
它是以遗传物质(如:DNA 或 RNA)为检查对象,利用分子
生物学技术,通过检查基因的结构或表达量的多少来诊断疾
病的方法。这里的遗传物质既可是外源性基因(如侵入机体
的病毒、细菌、支原体等病原微生物的基因),也可以是内源
性的基因(如癌基因、抑癌基因或突变的基因等)。因此基因
诊断(分子生物学诊断)主要是对遗传物质结构改变与否、
表达量变化与否进行检测,主要用于感染性疾病病原体诊断、
先天遗传性疾病诊断、基因突变性疾病(如肿瘤)诊断、产
前诊断、亲子鉴定和法医物证等。基因诊断的内容主要有:
(1)基因突变检测:如点突变、基因片段的缺失或插入、
基因重排等不同类型基因突变的检测。
(2)基因连锁分析:临床的一些疾病的致病基因尚不清
2
楚,很难用基因突变的检测诊断。因此对这些遗传疾病采用
基因连锁分析。
(3)基因表达分析:如 mRNA 定量检测及 mRNA 长度分
析等。mRNA 检测在基因表达水平上为基因功能是否正常提供
了直接依据。
(4)病原体诊断:即外来入侵病原微生物遗传物质的检
测。
二、基因诊断在诊断学中的位置
传统的疾病诊断方法主要是以疾病的表型改变为依据,
如症状、体征、物理检查、实验室检查,然而表型的改变在
许多情况下不是特异的,.同一种表型可能在多种疾病中出现,
而且表型往往在疾病发生一定时间后才出现,因此常不能及
时作出明确的诊断。研究发现各种表型的改变是由基因异常
造成的,也就是说基因的改变是引起疾病的根本原因。基因
诊断是病因的诊断,既特异又灵敏,可以揭示尚未出现症状
时与疾病相关的基因状态,从而可以对表型正常的携带者及
某种疾病的易感者做出诊断和预测,特别对确定有遗传疾病
家族史的个体或产前的胎儿是否携带致病基因的检测具有指
导意义。
三、基因诊断的常用技术
分子生物学技术是基因诊断的主要技术。近年来随着分
子生物学技术日新月异,以核酸分子杂交和聚合酶链反应
3
(PCR)为核心发展起来了多种方法已被广泛用于基因诊断,
如 PCR 一单链构象多态性( single strand conformation
po1ymorphism,sscp)、限制性片段多态性(restriction fragment
length po1ymorphism,RFLP)、等位基因特异性寡核苷酸分第
十章其他检测析(allele-specific o1igonucleotide,ASO)、基因
芯片技术(gene chip)、逆转录 PCR(re-verse transcription-PCR)、
Southern 印迹杂交(Southern blotting)、Northern 印迹杂交
(Northern blotting)、斑点杂交(dot blotting)和原位杂交(in
situ hybridization,ISH)等。
(一)核酸分子杂交技术
核酸分子杂交是指两条互补单链核酸(DNA 或 RNA)在
一定条件下按碱基互补原则退火形成双链的过程。它是研究
核酸结构与功能的常用技术。杂交的双方是探针与待检核酸,
杂交后形成的双链分子称为杂交分子(DNA-DNA、DNA-RNA
或 RNA-RNA)。分子杂交的方法多种多样,其共同点是:①应
用了核酸序列的复性原理;②都采用了标记探针。探针就是
同位素或非同位素(如:生物素或荧光染料等)标记的短片
段特异 DNA 或 RNA。常用的核酸分子杂交技术有:
1.Southern印迹杂交 Southern印迹杂交又称DNA印迹,
是英国科学家 Southern 于 1975 年发明的一种特定检测 DNA
片段的方法。其基本原理是:将基因组 DNA 用一种或几种限
制性内切酶消化成大小不同的片段,消化后用电泳的方法将
4
这些 DNA 按大小不同进行分离,分离后通过原位变性,将其
转印到固相支持物上,如:硝酸纤维素薄膜,再应用特异的
同位素或非同位素标记的 DNA 或 RNA 探针进行杂交,然后通
过对杂交信号的检测来确定探针互补条带的位置。基因的缺
失或突变可能导致带的缺失或位置改变。Southern 印迹的转
印方法有毛
您可能关注的文档
- Unit6 B Read and write.ppt
- unit5 dialogues.doc
- Unit9 When was it invented Section B 3a.ppt
- United_Star_Chart_eff_after_6_15-1.pdf
- Unit6 Eating and drinking.doc
- unit9公开课what-isyourfavorite-subject?.ppt
- Units&Conversions,3Ed.pdf
- unity3d官方汽车教程的翻译版本car2.pdf
- unit_12_I_can_swim_fast_.ppt
- Unit_15_E-Commerce.ppt
- 七年级上册语文古诗文理解性默写.pdf
- 模拟检测卷01(文科)-2025年高考数学二轮复习(全国通用)(解析版).pdf
- 2024年小学语文教师教学经验总结.pdf
- 2024-2025学年人教版八年级物理上学期期末复习:声的利用(含解析).pdf
- 2024-2025学年粤教版初中物理九年级上册配套教案:电路的组成和连接方式.pdf
- 模拟检测卷01(理科)-2025年高考数学二轮复习(全国通用)(解析版).pdf
- 人教版八年级英语下册期中知识点复习清单.pdf
- 如何解决冲突 - 2024-2025学年高一英语读后续写基础技巧与练习.pdf
- 基因的自由组合定律的遗传特例分析-2025年高考生物一轮复习(新人教新高考).pdf
- 高考作文模拟写作: “入框”““ ”破框”导写与范文4篇.pdf
文档评论(0)