黄色须腹菌发酵动力学解决方案.doc

黄色须腹菌发酵动力学研究 马仕波，叶建仁? (南京林业大学森林资源与环境学院，江苏 南京 210037) 摘要：本文对黄色须腹菌发酵罐发酵动力学进行了研究。通过分批发酵的方式，明确了发酵罐发酵过程中菌丝体比生长速率为0.158h-1，碳源用于产物积累的得率常数为-0.00035h-1，以及菌丝体生长动力学模型和基质消耗动力学模型。同时对实验数据与模型进行了验证比较，模型计算与实验结果拟合良好，模型能很好地反应黄色须腹菌菌丝体生长及基质消耗过程。 关键词：黄色须腹菌，分批发酵，动力学 中图分类号：TQ920.1 文献标识码：A Fermentation kinetics of Rhizopogon luteous MA Shi-bo, YE Jian-ren* (College of Forest Resources and Environment Nanjing Forestry University, Nanjing 210037) Abstract：It studied the?fermentation?kinetics of Rhizopogen luteous. The study suggested that the mycelium specific rate was 0.158h-1 , carbon source for the product accumulation rate constant was -0.00035h-1, and mycelium growth model and substrate consumption dynamics model was obtained in batches. Also we validated with the experimental data. The results showed that the model and experimental data fit well and the two models could reflect the mycelium growth process and the process of dynamic substrate consumption well. Key words：Rhizopogon luteous；Batch fermentation；Dynamics 黄色须腹菌是一株优良的侵染松科树种的外生菌根真菌[ ]，采用生物技术方法利用液体发酵培养黄色须腹菌菌丝体，并利用发酵菌丝液直接进行田间应用是目前最快捷的投入生产实践的应用方法。发酵动力学是研究各种环境因素与微生物代谢活动之间的相互作用随时间的变化而变化的规律的学科[ ]。在黄色须腹菌液体发酵罐发酵过程中，通过数学模型定量地描述发酵过程中的菌丝体生长状况，建立其动力学模型能很好地达到对发酵过程有效的控制，从而提高菌丝的产率以及降低生产成本[ ]。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1实验菌株 黄色须腹菌(Rhizopogen luteous)，由南京林业大学森林病理实验室提供。 1.1.2试剂 葡萄糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、维生素B1、氢氧化钠、盐酸、3，5-二硝基水杨酸、丙三醇、琼脂、马铃薯、有机硅消泡剂。 1.1.3实验仪器 摇床、恒温培养箱、电子分析天平、pH计、Eppendorf离心机、超净工作台、立式电热压力蒸汽灭菌锅、粉碎机、恒温电热鼓风干燥箱、上海国强自动搅拌新概念高级液体发酵罐。 1.1.4培养基 种子液培养基：马铃薯200g(去皮煮沸过滤取汁)，葡萄糖20g，MgSO4·7H2O1.5g，KH2PO43g，VB10.05g，水1000mL。 发酵培养基：马铃薯150g(去皮煮沸过滤取汁)，葡萄糖20g，MgSO4·7H2O1.2g，KH2PO42.5g，水1000mL。 1.2试验方法 1.2.1制备种子液 将保存的黄色须腹菌菌种无菌条件下接入PDA固体平板上，于28℃活化培养144h，待菌丝长满平板，无菌操作下，用打孔器(d=7mm)在黄色须腹菌平板菌丝边缘打取小菌饼6块，用挑针转接到装有100mL液体种子液培养基的250mL三角瓶中恒温摇床(28℃，180r/min)培养144h，把长势旺盛的菌丝体用灭菌的匀浆机打成匀浆，制得种子液。 1.2.2发酵罐培养 发酵温度设定为28℃，罐压0.05MPa，装料系数0.5，消泡剂0.05%，接种量5%，初始溶氧量100%，通气流量15L/M，初始转速400rpm，初始pH值5.4，进行发酵罐培养。 1.2.3取样和在线监测 每12h取样一次，每次取200mL发酵液离心(5000×g，20min)，倒出上清液，测定上清液总糖浓度，滤得菌丝体，80℃烘干至恒重，称量。溶解氧、pH值