园艺植物生物技术 第二章-组织细胞培养技术-2015.pdf

第二章 园艺植物组织培养 Tissue culture of horticultural plants 内容 ? Concept and types of tissue culture (TC) ? Role and application of TC ? Development of TC ? TC facility and medium 一、Concepts of Tissue culture （TC） ? Refers to technique of growing plant cells, tissues, organs, seeds or other plant parts on a nutrient medium in a sterile m a n n e r u n d e r c o n t r o l l e d environment ? 组织培养(Tissue culture)指通过 无菌操作分离植物体的一部分 (即外植体,explants）并接种到人 工培养基（medium)，在人工控 制的条件下（包括营养、激素、 温度、光照等）进行培养，使其 产生完整植株的过程。也叫离体 培养（In vitro culture） 外植体（Explants） ? A portion of plant removed and used for TC ? 由活植物体上切取下 来的可以用于组织培 养的组织或器官 lClassified based on ?培养方式 ?培养过程 ?培养材料 二、Types of TC l固体培养和液体培养 ü在固体培养基(solid medium，加琼脂的 培养基)上培养 ü在液体培养基(liquid medium，不加琼 脂的培养基)上培养 ?液体培养又有悬浮suspension培养和 静置stationery培养 1、根据培养方式 l 初代培养(primary culture) ü将从植株体上分离下来的第一次培养称为初 代培养 üThe first culture after the explants are removed from the mother plant l 继代培养(subculture) ü以后培养体转移到新的培养基，则统称为继 代培养 üCultures after the primary culture 2、根据培养过程分： 3、根据培养材料分 l 愈伤组织callus培养； l 器官organ培养； l 胚embryo培养； l 胚珠ovule和子房ovary培养； l 胚乳endosperm培养； l 花粉pollen和花药anther培养； l 细胞cell培养 l 原生质体protoplast培养 （1）愈伤组织培养（callus culture） ?Callus – an undifferentiated tissue, is a mass of actively dividing undifferentiated cells produced by plant tissue explant ? Callus can be resuspended in liquid media to create a suspension culture of single totipotent cells or differentiated into plant with the appropriate manipulations of culture conditions 原指植物在受伤后，于伤口表面形成的一团薄壁细胞。 在组织培养中，指在人工培养基上由外植体长出来的 一团无序生长的薄壁细胞。 Callus to plant A B C D 愈伤组织培养是最为常见的组织 培养方式？ ?原因： 1.大部分组织培养经历callus再生途径长出植株； 2.callus可以用于悬浮培养和原生质体培养。 愈伤组织培养 细 胞 培 养 器 官 培 养 原生质体培养 (2) 器官培养(organ culture) l主要是root tip、shoot tip茎尖、叶与未成熟果实 unripening fruit等培养。 ?根端的离体培养是研究生物合成的一种手段 ?茎尖培养具有快速繁殖和去除病毒的优点。 主要是对较小且未成熟的胚进行培养，研 究胚胎的发生以及影响胚生长的因素，特 别是所需有机营养成分的研究。 (3) 胚培养(embryo culture) 培养已传粉的子房及胚珠，是进行试管受 精和诱导单倍体植株的一个途径，也是研 究生殖生理的有效方法。 Used for fertilization in