ABI实时荧光定量PCR仪OLYMPUS共聚焦显微镜简介分析报告.pptxVIP

ABI实时荧光定量PCR仪OLYMPUS共聚焦显微镜简介 内容提要 一、ABI实时荧光定量PCR仪 实时荧光定量PCR原理及应用 ABI实时荧光定量PCR仪产品 二、OLYMPUS共聚焦显微镜 共聚焦显微镜原理及应用 OLYMPUS共聚焦显微镜产品 实时荧光定量PCR仪 定量PCR化学原理 DNA双链结合化学染料法 SYBR Green Ⅰ EvaGreen …… 标记荧光基团的寡聚核苷酸链（探针法） Taqman Probe Molecular Beacon Probe Hybridization Probe …… SYBR Green Ⅰ染料 单一特异峰值， RealTime PCR扩 增特异目标检测位 置，定量准确。 出现杂峰， RealTime PCR扩 增出现非特异扩增 产物，定量不准确。 原理：SYBR GreenⅠ与双链DNA小沟特异结合。PCR过程中变性时，DNA双链分开，SYBR GreenⅠ游离，荧光信号非常低；复性和延伸时，SYBR GreenⅠ与DNA双链结合，荧光信号增强1000倍。SYBR GreenⅠ与所有双链DNA小沟结合，无法区分非特异扩增产物、引物二聚体等干扰双链DNA，需要进行熔解曲线分析步骤区分不同GC含量PCR产物TM值，对PCR产物特异性进行检测。 熔解曲线分析 Taqman探针 Taqman探针为标记荧光基团的寡聚核苷酸链，与目标检