24分光光度分析法汇编.ppt

§1 概 述 §2 光吸收的基本定律 §3 分光光度计简介 §4 分光光度法的建立 §5 分光光度法的应用 第十二章 分光光度法 §1 概 述 一、分光光度法的特点 二、物质对光的选择性吸收 三、光吸收曲线 §1 概 述 分光光度法：在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为分光光度法。 主要有: 红外分光光度：分子振动光谱，吸收光波长范围 2.5?1000?m，主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外分光光度：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200?400nm（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。 可见分光光度：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400?750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。 一、分光光度法的特点 （1）灵敏度高； （2）准确度高； （3）操作简便、快速； （4）应用广泛。 二、物质对光的选择性吸收 1、物质的颜色 可见光：波长在400~750nm范围内的光为可见光。 红（620~750）、橙（590~620）、黄（560~590） 绿（500~560）、青（480~500）、蓝（430~580） 紫（400~430）。 单色光：具有一种波长的光。 复合光：由几种单色光混合而成的光。 白光：由红、橙、黄‥‥‥七种颜色的光按一定的强度 比例混合而成。 互补色光：如果把两种适当颜色的光按一定的强度比例 混合也可以得到白光，那么这两种光为互补色光。 互 补 色 光 示 意 图 白光 溶液的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性吸收而产生的。 溶液的颜色显示其吸收光的互补色。 2、物质对光的选择性吸收 例：硫酸铜溶液吸收黄色光而呈蓝色； 高锰酸钾溶液因收吸绿色光而呈紫色。 光的互补：蓝?? 黄 用不同波长的单色光分别照射某一溶液，测量在每一波长下溶液对该波长光的吸收程度，以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制曲线，描述物质对不同波长光的吸收能力。 三、光吸收曲线 A~ ? (nm) 吸收曲线 吸 收 曲 线 吸收曲线的讨论： （1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长?max 。 在?max处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。 吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。 （2）同一种物质溶液的浓度不同，吸收峰值不同。 这是定量分析的依据。 （3）从吸收曲线形状可以解释物质的颜色。物质的颜色与吸收光颜色互为补色。 （2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似，?max不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和?max则不同。 吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。 §2 光吸收的基本定律 一、朗伯-比耳定律 二、偏离朗伯—比耳定律的原因 §2 光吸收的基本定律 一、朗伯-比耳定律 1、透光率、吸光度 入射光——I0 吸收光——Ia 透射光——It 反射光——Ir I0 = Ia + It + Ir 透光率（ T ）：描述入射光透过溶液的程度。 T = It / I0 吸光度（ A ）：描述溶液对光的吸收程度。 A＝lg(I0/It) 吸光度A 与透光度T 的关系: A ＝ －lg T 样 品 溶 液 吸 收 光 示 意 图 Ir Ia 2、朗伯-比耳定律 A：吸光度； I0 ：入射光强度； It：透射光强度； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； K：比例常数；与吸光物质的性质、温度、波长等有关。 c : 溶液的浓度 式中: A＝lg(I0/It)= Kb c 朗伯-比耳定律的数学表达式为： 朗伯-比耳定律是分光光度法的理论基础和定量测定的依据。广泛地应用于紫外光、可见光、红外光区的吸收测量，也适用于原子吸收测量。 吸光度A具有加合性： A总= A1+ A2 A1、A2分别为两种吸光物质的吸光度。 朗伯-比耳定律的物理意义 当平行单色光通过单一均匀的、非散射的吸光物质溶液时,溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。 摩尔吸光系数ε(L·mol-1·cm-1)在数值上等于吸光物质浓度为1