骨髓细胞学检查讲述.ppt

骨髓细胞学检查 主要内容 概述 骨髓检查适应症禁忌症 血细胞生成发展规律形态特点 细胞化学染色 正常骨髓象 常见血液病骨髓象 一、概 述 骨髓是人出生后的主要造血组织。 骨髓组织由网状组织、基质、血管系统和神经等构成的造血微环境，以及充满其间的发育过程中的血细胞所组成。 骨髓形态学主要检查骨髓中各系列血细胞数量的增减及其比例的改变，形态的异常，可以了解骨髓的造血功能和病理改变。 二、血液科 基本操作 骨髓穿刺 bone marrow puncture 骨髓抽吸 Bone marrow aspiration 骨髓涂片 Bone marrow smear 骨髓活检 Bone marrow biopsy 临床应用 血液病的诊断,分期和疗效的评估 了解恶性肿瘤有无骨髓侵犯 感染性疾病或发热待查,病原生物学培养 临床疑难病例 骨髓穿刺的禁忌症 血友病 局部皮肤感染 出血倾向者 病情危重者 标本采集 部位：髂后上棘、髂前上棘、胸骨 量：0.2ml（涂片） 3-5ml （免疫分型、培养等） 穿刺成功标志： 抽取骨髓一瞬间，病人有特殊的疼痛感 抽取的骨髓液内含有骨髓小粒。 显微镜下可见骨髓特有的细胞如巨核细胞、浆细胞、组织细胞等 杆状核分叶核 骨髓涂片的显微镜检查 低倍镜 观察取才、涂片、染色情况 观察骨髓增生程度 计数巨核细胞 观察有无异常细胞 油镜 选择染色良好、分布均匀的部位，计数200个有核细胞，分类 骨髓标本的分类部位 骨髓增生程度分级(高倍镜） 极度减低 1~5/HP 增生减低 5~20/HP 增生活跃 20~50/HP 明显活跃 50~100/HP 极度活跃 100/HP 三、血细胞的生成，发育规律及正常形态学特征 （一）血细胞的生成 所有的血细胞均起源于共同的造血干细胞 ①具有高度自我更新的能力，以保持干细胞池数量的恒定，维持机体终身的稳定造血； ②具有多向分化的能力，即可向各系列祖细胞分化，然后经过增殖、发育和成熟，成为各系细胞。 造血干细胞：包括全能干细胞（TSC）及由其分化的骨髓系干细胞和淋巴系干细胞。 受造血微环境、造血细胞生长因子和白细胞介素以及神经和体液因子的调控，其中造血微环境最重要。 造血干细胞的分化及增殖示意图 ㈡、血细胞发育过程中形态学演变的一般规律 原始 幼稚 成熟 体积 大 小 外形 圆(椭圆） 大多圆、椭圆、卵圆形，巨核不规则 核浆比 核大质少 核小质多 核形 圆(椭圆） 凹陷 分叶 核仁 多、清晰 少（不清） 消失 核染色质 细致 疏松 粗糙(块状) 胞浆 深蓝、少 灰蓝 粉色、多 ㈢、血细胞的正常形态学特征 1、红细胞系统 erythrocytes 原红（normoblast） 早幼红（basophilic normoblast） 中幼红（polychromatic normoblast） 晚幼红（orthochromatic normoblast） 2、粒细胞系统 granulocytes 原粒（myeloblast） 早幼粒（ pro myelocyte） 中幼粒（myelocyte）：中性、嗜酸、嗜碱 晚幼粒（metamyelocyte） 杆状核粒（stab granulocyte,band granulocyte） 分叶核（Segmenteel granulocyte） 3. 单核系统 monocytes 4. 淋巴系统 lymphocytes 5.浆细胞系统 plasmacytes 6.巨核细胞系统 magakarocytes 四、常用细胞化学染色及临床意义 （一）过氧化物酶染色 (POX) 【原理】 粒细胞及分化较好的单核细胞胞浆内的POX能分解H2O2，产生新生态氧使无色的色原（如联苯胺）氧化显色，定位于胞浆内。计数100个原始细胞，报告阳性细胞百分率或用－，＋，＋＋，＋＋＋，＋＋＋＋5个等级进行积分值计算 过氧化物酶 过氧化物酶染色 (POX)临床意义 主要用于急性白细胞类型的鉴别 急性粒细胞白血病： 强阳性（颗粒较粗大，呈局灶分布） 急性单核细胞白血病： 弱阳性（颗粒细小、稀少、 散在分布） 急性淋巴细胞白血病： 阴性，ALL骨髓中残留的原粒细胞POX可为（+），但比例小于3% （二）苏丹黑染色 【原理】是一种脂溶性染料，可溶于细胞质内的含脂物质，是之呈棕黑色或深黑色颗粒。 【临床意义】同POX染色反应 （三）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP） 【原理】碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞（分叶核及杆状核）内，在碱性条件下能水解基质液中的α-磷酸萘酚，产生α-萘酚，其与重氮盐偶联，形成不溶性棕黑色偶氮染料沉淀。阳性反应为胞质中出现灰色到棕褐色颗粒，计数100个成熟中性粒细胞，报告阳性细胞百分率或用－，1＋，2＋，3＋，4＋