生物芯片技术分解.ppt

Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 生物芯片技术 温州医学院检验医学院生命科学学院 分子生物学检验技术 ? 第九章 免疫共沉淀（Co-IP） Pull down assay 章节提要 生物芯片始于上世纪90年代，随着人类基因组计划而诞生的一项新技术。它是由Southern印迹技术衍生而来，是一门多学个交叉的综合技术，这项技术涉及到了生命科学、计算机、微机械、微电子、物理、化学、数学等领域。 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 定义：通过微加工和微电子技术，在固相基质表面集成了成千上万密集排列的分子微阵列，以实现对组织，细胞，核酸，蛋白质及其他生物分子进行有效、准确、高通量的检测。 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 章节提要 种类：基因芯片、蛋白质芯片、组织芯片、液相芯片、缩微芯片实验室。 各类芯片的定义。 最终目标：把生物和化学等领域所涉及的样品制备，生化反应和检测分析的整个过程集成化，并缩微到一张芯片上自动完成，形成缩微芯片实验室。 章节提要 章节提要 芯片技术的优点：多样品并行处理、分析速度快、所需样品量少、污染少。 应有的领域：基础研究、临床诊断、药物筛选，指导用药与治疗、农作物优育优选、环境检测、卫生监督、司法鉴定。 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 以结构与工作机制可分为微阵列芯片与微流体芯片 微阵列芯片：由生物材料微阵列构成的芯片，以分子间的亲和结合作为核心，以在固相载体表面固定一系列可寻址的识别分子阵列为结构特征，如碱基配对，抗原抗体结合，包括基因芯片，蛋白质芯片，组织芯片等。 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 章节提要 微流体芯片：以微管道网络为结构特征，实现对各种生化组分的微流控操作和分析，包括毛细管电泳芯片，PCR反应芯片等 缩微芯片实验室优势：将样品制备、生化反应、检测等过程集成在一个系统中。它是未来芯片发展的主流方向之一，也是生物芯片发展的最终目标。 章节提要 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 本章节主要的学习内容 基因芯片（gene chip） 蛋白质芯片（protein chip） 缩微芯片实验室（laboratory on a chip） Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 第一节 基因芯片 基因芯片(gene chip)又称DNA芯片（DNA chip）或DNA微阵列（DNA microarray）。 将大量的基因片段有序地、高密度地排列在玻璃片或纤维膜等载体上，称之为基因芯片。 DNA Microarray 的原理 经过标记的待测样品DNA通过与芯片上特定位置的探针按碱基配对原理杂交后，经激光共聚焦荧光检测系统等对芯片进行扫描，通过检测杂交信号强度来获取样品分子的数量与序列信息，用计算机软件进行数据比较与分析，从而对基因序列及功能进行大规模，高通量的研究。 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 一、基因芯片的原理 基因芯片技术是建立在基因探针和杂交测序技术上的一种 高效、快速 核酸序列分析手段。 同时也是最先发展，最为成熟，最先商品化的生物芯片 芯片分类 载体不同：玻璃芯片、膜芯片、硅芯片、陶瓷芯片 方法不同：原位合成、直接点样 探针不同：寡核苷酸、cDNA、基因组芯片 用途不同：表达谱、测序芯片、诊断芯片、SNP分型 分析步骤为： 生物芯片的制作、样品处理及标记、杂交或反应、杂交检测及数据处理等。 芯片技术发展的关键 无孔的固相载体，如玻璃 高密度寡核苷酸片段的原位合成技术 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 载体的定义与种类 定义：用于连接、吸附或包埋各类生物分子使其以水不溶性状态行使功能的固相材料。 玻片 固体片状 硅片 瓷片 硝酸纤维素膜 膜性材料 尼龙膜 聚丙烯膜 具有可以进行化学反应的活性基团，便于与生物分子进行偶联。 要有惰性与稳定性：惰性（非