第十章细胞增殖及调控主要内容1、细胞周步化概念及方法2、细胞.doc

第十章 细胞增殖及调控 主要内容： 1、细胞周步化概念及方法 2、细胞周期时相及主要事件 3、有丝分裂及有关结构（中心粒、动粒、联合复合体等） 4、有些分裂、减数分裂各期主要特点 5、细胞周期调控及调控因子 倍增后的DNA必须严格地平均分配到两个子细胞中，因为有：（1）严格的监控系统；（2）特异的细胞分裂机制 第一节 细胞周期与细胞分裂 一、细胞周期 按从一沉细胞分裂结束开始，经过物质积累过程，直到下一次细胞分裂结束为止。 （一）概述 正常情况下，沿G1→S→G2→M期路线运转 细胞周期时间（Tc）长短不一 测定：采用3H-TdR脉冲标记，定时取材，利用放射自显影方法，统计标计有丝分裂细胞百分数加以测定。 →图11-1 11-2 从增殖角度分类： 周期中细胞（连续分裂细胞）---小肠绒毛上皮腺窝细胞，表皮基底部细胞，造血细胞等。 休眠细胞（G0期细胞）---暂时脱离细胞周期，不进行增殖，但在适刺激下重新进入细胞周期的细胞。如：免疫淋巴细胞，肝、肾细胞，成纤维细胞。 终末分化细胞---不可逆的脱离细胞周期，丧失分裂能力，但保持生理机能活动的细胞。如：横纹肌细胞，多形核细胞。 （二）细胞周期中各个不同时期及其主要事件 （1）cdc基因——有些分裂有关的基因，它的有序表达受控制点的调控细胞分裂周期基因）和监视。 （2）控制点——G1/S转换点（S启动点）G2/m检验点 （3）SPF——S期激活因子，促进S期DNA合成，S期中常染色质较异染色质复制早，早期DNA GC含量高，晚期AT含量高。 1、G1期合成蛋白质（及F）糖类、脂质，但不合成DNA 外因 营养激素。 R点（restrictTon point）对称S启动点 内因 cdc 基因产物为蛋白激酶、磷酸酶等。 cdc—cell division cycle gene 2、S期 DNA复制 半保留 与核骨架、核纤层、核膜密切相关。 DNA是否完全复制 3、G2期 G2检验点 Cell生长合适大小 环境因素 有丝分裂 Mitosis 4、M期 纺缍体装配检验点 减数分裂 Meiosis （三）细胞周期长短测定 121min-years 1、脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 2、流式细胞分选仪测定法 （四）细胞周期同步??? 指自然的或经人为选择或诱造成的细胞同期同生化（自然同步化、人工同步化，自然同生化---自然界存在的细胞周期同生过程等）。 如：许多动物可以1次产下许多均处于细胞周期的同一时期的卵cell 1、选择同步化 有丝分裂选择法：对数生长期细胞，分裂活跃，分裂指数方，分裂细胞变圆，隆起，与培养皿的附着性降低，轻振荡，脱落。 优点：同步化程度。，缺点：分离cell少，量少 →图11-5从培养细胞中收集m期细胞的同步化方法。 2、诱导同步化 （1）DNA合成阻断法 DNA合成抑制剂，可逆地抑制DNA合成，但不影响其它各期正常运转，最终将cell群体阻断在S期。 常用：G1/S-TDR双阻断法 →pp6 图11-6 过量3H-TDR双阻断法 （2）中期阻断法 抑制有丝分裂器形成，阻断在细胞分裂中期。 常用秋水仙素，秋水酰胺。 （五）特异的细胞周期 ——那些特殊的细胞所具有的标准的细胞周期相比有着鲜明特点的细胞周期。 1、早期胚胎cell cycle 2、酵母 cell的cell cycle 3、植物cell cycle （无中心体 从中间板的方式→胞质分裂） 4、细菌的cell cycle 二、有丝分裂 有丝分裂器——有丝分裂时产生的由徽管及其结合蛋白所组成的星体和纺缍体。 （aster）星体——中心体及周围的微管合称星体。 纺缍体——由大量MT在赤道面垂直排列组成的中部宽阔，两级缩小的细胞器，形如纺缍。 （一）中心体、动粒、纺缍体——与有丝分裂直接相关的亚细胞结构 1、中心体——一种SMT装配和细胞分裂密切相关的细胞器。 筒状小体---中心粒*2 互成直角 直径0.25微米，长度不定 9*3+0型。 中心体 PCM---中心粒周围物质 r微管蛋白。 Ppt 图11-15 中心体循环 2、动粒（着丝点）是附着于着丝粒中的一种细胞器 A 内 B 内侧 .80kD C 内 140kD 动粒Pr CENP D 动粒 E 312kD 动粒外表面冠口，驱动蛋白 F 核骨架蛋白 330kD DNA 卫星DNA →ppt Fig 11-16动粒结构模式图 3、纺缍体（spindle） ——细