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1. 高效液相色谱分析方法的建立
2. 高效液相色谱仪常见问题及处理方法
3. 制备型高效液相色谱技术
4. 高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS);高效液相色谱仪常见问题及处理方法;吸滤头;材料:不锈钢烧结,孔径10μm
故障:堵塞
表现:管路中不断有气泡生成
措施:用5%~20%的稀硝酸,超声波清洗,
再用蒸馏水清洗
注意点:吸滤头拆下时不得将塑料管剪断;二、高压泵;单向阀结构;故障1:宝石球粘附于垫片
表现:泵无法吸液或排液,流路不通,柱压低或没有。
措施:1)用针筒抽单向阀的出口以产生负压,
使宝石球与垫片分开
2)拆下单向阀,放入异丙醇或水中,
用超声波清洗;故障:密封圈磨损而导致
密封不良
现象:系统压力波动大或
漏夜
措施:更换密封圈
注意点:更换密封圈拆卸泵头前,柱塞杆复位 (P-SET);三、手动进样阀;1. 构造及使用原理;故障1:转子密封损坏
现象:漏液
原因: a 拧的太紧
b 样品太脏(过滤不充分)
c 针头损坏或未使用液相色谱专用注射器
解决措施:更换转子密封,并在使用时注意保养。
故障2:载样困难
原因: 定量环堵塞
解决措施:清洗或更换定量环
;样品过滤:;故障:系统压力过高、峰型变差(拖尾峰、前沿峰、分叉峰),保留时间改变等。
解决措施:清洗、填补、更换
正相柱清洗溶剂:
正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇等
反相柱清洗溶剂::
甲醇、乙腈、氯仿、异丙醇、0.05mol/L稀硫酸
注意:应排除操作不当引起的假象。;色谱柱的维护;肩峰或分叉峰产生的原因:;柱的补修;恢复实例;1. 更换氘灯(紫外检测器);1. 溶剂的过滤
滤膜类型:
聚四氟乙烯滤膜:
适用于所有溶剂,酸和盐。
醋酸纤维滤膜:
不适用于有机溶剂,特别适用于水基溶剂。
尼龙66滤膜:
适用于绝大多数有机溶剂和水溶液,可以用于强酸,不适用于二甲基甲酰胺。
再生纤维素滤膜:
蛋白吸收低,适用于水溶性样品和有机溶剂。;1)泵中气泡使液流波动,改变保留时间和峰面积;
2)柱中??泡使流动相绕流,峰变形;
3)气泡过多可使泵压力不稳甚至停止工作;
4)检测器中的气泡产生基线波动,
① 示差折光检测器——使折射率变化
② UV检测器(200nm以下)——溶解氧气有吸收
③ 荧光检测器——溶解氧气有荧光猝灭作用
;氟树脂膜;3. 缓冲液
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