用双光束紫外—可见分光光度计测量溶液的吸收率实验讲义要领.docVIP

PAGE  PAGE 10 用双光束紫外—可见分光光度计测量溶液的吸收率 实验目的 了解光与物质相互作用的机理和类别。 熟悉双光束紫外—可见分光光度计的工作原理和使用方法 测量溶液的吸收率 实验原理 由于分子内部的运动既有价电子的运动，又有内部原子在平衡位置的振动和分子绕其质心的转动。因此，分子具有电子能级﹑振动能级和转动能级。图1是双原子分子能级示意图。 图1 双原子分子的电子、振动和转动能级示意图 图中A和B是电子能级，在同一电子能级A，分子的能量还要因振动能级的不同而分为若干“支级”，称为振动能级。图中V?=0,1,2,……表示在电子能级A的各振动能级。V??=0,1,2,……表在电子能级B的各振动能级。处在同一电子能级和同一振动能级的电子，因转动能量的不同又可为若干“分级”，称为转动能级。J?=0,1,2,……表示在A电子能级和V?=0振动能级的各转动能级。J??=0,1,2,……表示在A电子能级和V?=1振动能级的各转动能级。故分子的能量等于电子能（）、振动能（）和转动能（）之和： （1） 当基态分子从外界吸收能量后，便发生分子的能级跃迁，即从基态能级跃迁到激发态能级。分子的能级是量子化的，其吸收能量也具有量子化特征，即分子只能吸收等于两个能级之差的能量： （2） 由于三种能级跃迁所需的能量不同，故分子受不同波长的电磁辐射后跃迁，其吸收光谱在不同的光区出现。 电子能级跃迁所需的能量较大，一般在1～20。根据电子能级跃迁所需的能量由（2）式可计算其相应的波长。反之，根据波长可计算其相应的跃迁能量。 这种由于分子吸收电磁辐射后而产生电子能级跃迁所获得的分子吸收光谱称为电子光谱，又因为电子光谱主要处于紫外—可见光区，或称为紫外－可见光谱。 分子振动能级跃迁所需的能量约比小10倍,一般在0.05～1,相当于红外光的能量。所以,因振动能级跃迁而产生的分子吸收光谱称为振动光谱,或称红外光谱。 分子转动能级跃迁所需的能量约比小10到100倍,一般小于0.05,相当于远红外光甚至微波的能量。所以，因转动能级跃迁而产生的分子吸收光谱称为转动光谱，或称远红外光谱。 分子吸收电磁辐射而发生电子能级间的跃迁和振动能级间的跃迁时,总伴有转动能级间的跃迁。由于转动能级间隔太小,一般光谱仪的分辨能力不足以把这些谱线分开,诸谱线便连成一片,表现为带状。所以,分子吸收光谱是一种带状光谱。 如图2所示，由光源D（或W）发出的复合光，经分光器G色散为单色光，此单色光经旋转扇形镜调制为1500转/分钟的交变信号，并分成S和R两束。此两束光分别通过样品池和参比池而到达接受器B。扇形镜构造如图3所示，S为透射光束，R为反射光束，D为不透也不反的背景，因此，由接受器（光电倍增管）输出如图4所示的电信号。与扇形镜同步旋转的编码器分别控制三路信号的通断，使之依次通过放大、转换及运算处理系统，并将扣除背景D之后的透射比输出。 2dsin(?)=K? 图2 工作原理示意图 图3 扇形镜 图4 输出信号示意图 实验仪器 本实验是在天津市港东科技发展有限公司生产的WGZ—8型双光束紫外—可见分光光度计上进行。该仪器由主机、计算机、显示器、键盘、打印机及配套电线、电缆组成。其连接方式如图5所示 图5 仪器连线图 下面对该仪器的性能及规格、光学系统、扫描系统、狭缝及滤光片转换机构、光源转换机构和整机的电子电路及数据处理系统分述如下。 性能及规格 工作波段 200—800nm 波长精度 ±0.5nm 波长重复性 0.3nm 光谱宽度 0.1、0.5、1.0、2.0、6.0nm 分辨能力 0.3nm 杂散光 ?0.3% 测量范围 透过率0—200%T 吸光度-3—2.5Abs（线形保证） 测量精度 透过率0.5% (0—100%T) 吸光度0.005Abs(0—0.5Abs) 横坐标扩展 任选 纵坐标扩展 任选 测试方式 能量、透过率、吸光度 扫描方式 单程、重复、定点 外形尺寸 主机： 710×605×210(mm)3 显示器： 395×365×320(mm)3 计算机： 430×420×140(mm)3 键盘： 480×190×35(mm)3 功率 220V±10% 50HZ±1HZ 约300W 重量 主机： 约50kg （二）光学系统 仪器的光学系统如图6所示 图6 光路系统原理图 图