第七章细胞核与染色体主要内容1、核孔复合体的结构与功能2、染色.doc

第七章 细胞核与染色体 主要内容： 1、核孔复合体的结构与功能 2、染色质类型、化学组成 3、染色体1-4级结构 4、染色体DNA的关键序列及主要作用 5、核仁超微结构与功能 概述：发现：1831年 R.Brown首次命名 筛管与红cell无核，原核无核 核V/CV≈10% φ≈5-10μm（动） φ≈5-20μm（植） →ppt 8-1 细胞核 植被模 染色质 核仁 核骨架 第一节 核被膜与核孔复合体 是细胞核与细胞质之间的界膜 进化意义： （1）保护DNA免受骨架运动产生机械损伤； （2）形成功能区域，时空上分开，防止彼此干扰； （3）通过核孔复合体，进行核质间物质，信息的交流； 膜厚7.5mm 一、核被膜（nuclear envelope） 形成：在cell周期中，发生有规律地解体与重建。前期末期体，末期形成。 实验：3H核膜 真核的变形虫 放射 性标记平均分配到子细胞的核被膜中 →亲代核膜参加了子代核膜的重建 装配（以非洲爪蟾卵母细胞为例）：φ200nm膜泡→染色质表面排列→双层膜→融合处为核孔→核膜 二、核纤层：（nuclear lamina） ——分布于核膜与染色质之间紧贴内核膜的一层蛋白网络结构，厚的10-20nm 3种多肽：核纤层蛋白（lamina）A、B、C 60-75KD 功能：为核膜及染色质提供了结构支架，介导核膜、染色质之间的相互作用 与核被膜的解体与重建有关： 分裂前期 lamina 核纤层解体→核被膜解体， 分裂末期 lamina 重建核层→核被膜重建 三、核孔复合体（nuclear pore complex,NPC） 哺孔动物核被膜上 10-50个/μm2 核孔φ≈80-120nm （一）结构 →PPt 8-3 核孔复合体结构 （二）成分：100多种，最具代表性的gp210、P62 特征蛋白-gq210（N-连接糖蛋白），1个信号序列，2个疏水片断（介导插入ER） 作用：将NPC锚定在孔膜上，稳定NPC，核质物质交换 与ConA（伴刀豆球蛋白）强烈亲合 P62：——（O-连接糖蛋白）。+ 作用：构成胞质和核质丝状物，直接参与核质交换 与WGA（麦胚凝集素）强烈亲合。 （三）NPC功能 双功能 双向性交换通道 1.被动扩散 亲水通道 功能直径9-10nm 5KD 可自由扩散 60KD 几乎不能进入 →ppt 8-4 通过核孔复合体物质运输的功能示意图 但并非总见如此，如组蛋白H1，分子质量21KD，因本身带信号序列→主动，有些小分子无信号序列，但结合其它有信号序列→主动 自由扩散：离子、水溶性分子 2.主动运输 哺乳类核被膜有3000-4000个核孔 如正在合成DNA，需106组Pr输入/3，即100个组Pr/分核孔大分子的核质分配，核孔复合体主动运输，具高度选择性，并且是双向的。 选择性：a、对运输颗粒大小的限制，主动运输的功能d=10-20nm，比被动扩散大，甚至达26nm，说明：核孔复合体的有效直径可调。 b、是一个信号识别与载体介导的过程，需ATP。 c、双向性（核输入、核输出） ⑴、亲核蛋白的核输入 亲核蛋白的核输入—：cell质内合成，然后输入到核内发挥功能作用的一类蛋白 如：RNA聚合酶、DNA聚合酶、组蛋白、核糖体蛋白、核纤层蛋白 亲核的输入信号存在于尾部结构域中 核质蛋白为一种等核蛋白。 实验：爪瞻卵母细胞核质蛋白注射实验→核输入需信号 →ppt 8-5 核定位信号：NLS 短肽 4-8Aa 正电荷Lys Arg Pro 第一个被蚁定的NLS构成：Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val 与指导蛋白质跨膜运输的信号肽不同，NLS可存在于导亲核蛋白的不同部位，且输入后被切除 ⑵、需载体：NBP（NLS结合蛋白） 转运过程：a、结合 b、停泊 c、转运 →PPt 8-6 亲核蛋白从细胞质向核的输入 2、RNA及RNPII单方的核输出 选择性MRNA前体只有在核内经转录后加工、修饰，成为成熟的RNA后才能被转出核。表现在： （１）由ＲＮＡ聚合酶Ｉ转录的ＫＮＡ分子，总是在核仁中与核输入的糖体蛋白结合成亚单位，以RNP输出。 （2）由RNA聚合酶II转录的hnRNA，需5加帽，3尾及剪接等加工，然后形成成熟的MRNA。 帽结合活性（CBA） 输出过程需受体介导。 （3）由RNA聚合酶直接转录的5srRNA与tRN是一种由蛋白质介导的过程 第二节 染色质 1879年，W FLemaling提出 一、概念及