化生专业微生物-第7章-微生物的生长幻灯片.pptVIP

第7章 Chapter 7;生长（growth）：生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体体积扩大的生物学过程。;Chapter7-1-测定生长繁殖的方法（Methods for determining cell density ）; 通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌）。;1、菌落计数法（colony-counting method）;准备平板计数的平板的方法 涂布法（spread plate） 混菌法（pour plate）;厌氧菌的菌落计数可以采用半固体深层琼脂法。;2、显微镜直接计数法 （counting them under a microscope） ; 没有计数板时，可将已知颗粒浓度的样品与待测细胞细胞浓度的样品混匀后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。;二、生物量测定法（Follow the amount of important cellular component ）; 原理是一定范围内，菌悬液中的细胞浓度与浑浊度成正比，与透光度成反比。 在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度（optical density, 即OD）表示菌量。;以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量；;Chapter7-2-微生物的生长规律（Regularity of Microbial Growth）;一、单细胞微生物的典型生长曲线（Traditional growth curve of single-cell microbe）;根据微生物的生长速率常数，生长曲线可以分为： 延滞期，对数期，稳定期和衰亡期等4个生长时期; 也称调整期、适应期，指将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加，或增加很少的一段时期。;（1）延滞期的特点;（2）延滞期出现的原因;（3）缩短延滞期的方法 ;2、对数期（log phase）; 生长速率常数最大，代时最短； 细胞进行平衡生长，菌内各成分十分均匀； 酶系活跃，代谢旺盛。;繁殖代数（n）：一定时间内细胞分裂的次数。 生长速率常数（growth rate constant，R）：单位时间内细胞分裂的次数。 代时（Generation time，G）：在细菌个体生长里，每个细菌分裂繁殖一代所需的时间。 倍增时间（Doubling time）：在群体生长里细菌数量增加一倍所需的时间。;（3）影响代时的因素; 又称恒定期或最高生长期，生长速率常数降为0（即细菌分裂增加的数量等于细菌死亡数），菌体产量达到最高点。; 生长速率常数为0，菌体产量达到最高点； 储存糖原等细胞质内含物； 积累代谢产物的重要阶段，某些放线菌抗生素的大量形成也在此时期； 芽孢杆菌在此阶段形成芽孢或建立自然感受态等。;（2）稳定期出现的原因; 细菌个体死亡速率超过新生速率，整个群体呈现出负增长（R为负值）。; R为负值； 细胞呈现多种形态，如产生畸形，大小悬殊，革兰氏染色反应变化等； 细菌衰老并出现自溶，产生或释放出一些产物，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。 ;二、连续培养、同步培养和高密度培养; 培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是实现微生物连续培养的基本原则。;同步培养（Synchronous culture） ：使群体中的细胞处于比较一致的，生长发育均处于同一阶段上，即大多数细胞能同时进行生长或分裂的培养方法。;Chapter7-3- 微生物的培养法概论（Overview of Microbial Culturing） ;微生物培养技术的发展 从小规模培养到大规模培养； 从固体培养到液体培养； 从单批培养到连续培养； 从利用微生物细胞到利用动植物细胞培养； 从利用野生型菌株到变异菌株和遗传工程菌株； 从单菌发酵到混菌发酵； 从低密度培养到高密度培养； 从人工控制的发酵罐到自动化发酵罐。;一、实验室培养 （Culture methods in laboratory）;（2）厌氧菌（anaerobes）;2、液体培养（in liquid medium）;（2）厌氧菌（anaerobes）;二、生产实践中的培养 （Culture methods in industry production）; 生长是微生物与外界环境因素共同作用的结果。环境条件的改变，在一定限度内，可引起微生物形态、生理、生长、繁殖等特征的改变。当环境条件的变化超过一定极限，则导致微生物的死亡。;一、温