第二章蛋白质化学试卷.ppt

第二章 蛋白质化学 (10学时);（1）熟悉蛋白质的基本结构单位：氨基酸；肽；蛋白质的一级结构、二级结构、超二级结构和结构域、三级结构四级结构；蛋白质的两性性质、等电点与电泳、紫外吸收性质、胶体性质、蛋白质的沉淀；变性与复性；蛋白质的呈色反应。 （2）了解蛋白质的分类；蛋白质分子结构与功能的关系。 ;蛋白质 是由许多不同的α-氨基酸按一定的序列通过酰胺键（肽键）缩合而成的，具有较稳定的构象并具有一定生物功能的大分子。;一、蛋白质的生物学意义;二、蛋白质的元素组成;三、蛋白质的氨基酸组成;不带电形式;（二）氨基酸的分类;（三）氨基酸的重要理化性质;调节氨基酸溶液的pH，使氨基酸分子上的—+NH3基和—COO-基的解离程度完全相等时，即所带净电荷为零，此时氨基酸所处溶液的pH值称为该氨基酸的等电点（pI）。 ;（2）与甲醛的反应：氨基酸的甲醛滴定法;（3）与2,4-二硝基氟苯(DNFB)的反应;H2N—CH—COOH +;（4）与异硫氰酸苯酯（PITC）的反应;（5）与荧光胺反应： 根据荧光强度测定氨基酸含量（ng级）。激发波长λx=390nm，发射波长λm=475nm。产生具荧光物质。;H2N—CH;（7）成盐反应;（9）成酯反应;（11）成酰胺反应;（13）迭氮反应;四、肽;（一）谷光甘肽（GSH）;（三）促肾上腺皮质激素（ACTH）;（五）胆囊收缩素;五、 蛋白质的结构;HPhe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His- Leu-Val- Glu- Ala- Leu- Tyr –Leu -Val-Cys-Gly;一级结构确定的原则：将大化小，逐段分析，制成两套肽片段，找出重叠位点，排出肽的前后位置，最后确定蛋白质的完整序列。;由于羰基碳-氧双键的靠拢，允许存在共振结构（resonance structure），碳与氮之间的肽键有部分双键性质，由CO-NH构成的肽单元呈现相对的刚性和平面化，肽键中的4个原子和它相邻的两个α-碳原子多处于同一个平面上。;1. 蛋白质的二级结构;左手螺旋与右手螺旋;3)R侧链基团伸向螺旋的外侧。R基团越大，空间位阻，螺旋不易形成。;;（2）β-折叠结构（β-pleated sheet）;（3）β-转角（β-turn）;（4）自由回转;2. 超二级结构和结构域;结构域是球状蛋白质的折叠单位。多肽链在超二级结构的基础上进一步绕曲折叠成紧密的近似???行的结构，具有部分生物功能。对于较大的蛋白质分子或亚基，多肽链往往由两个以上结构域缔合而成三级结构。;3. 蛋白质的三级结构;共价键;六、蛋白质分子结构与功能的关系;镰状细胞贫血（sick-cell anemia） 从患者红细胞中鉴定出特异的镰刀型或月牙型细胞。;（二）蛋白质构象与功能的关系;2;七、蛋白质的性质;蛋白质分子量（M）与沉降系数（s）的关系;（二）蛋白质的两性电离及等电点;1. 自由界面电泳：蛋白质溶于缓冲液中进行电泳。;2. 区带电泳：将蛋白质溶液点在浸了缓冲液的支持物上进行电泳，不同组分形成带状区域。;（2）凝胶电泳：用凝胶（淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺）作支持物。;等电聚焦电泳：当蛋白质在其等电点时，净电荷为零，在电场中不再移动。;（三）蛋白质的胶体性质;（四）蛋白质的沉淀反应;（五）蛋白质的变性;反应名称 ;六、蛋白质的分类;2. 分子组成;本章较全面地介绍了蛋白质化学的基本知识，重点阐述了氨基酸和蛋白质的结构、性质和功能间的依存关系。在学习氨基酸的结构时应联系有机化学的羧酸结构，在学习氨基酸的化学性质时应联系氨基酸的结构，再将氨基酸的结构和特性与蛋白质的结构和特性联系起来。认识蛋白质的重要生物学意义。;本章作业