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原核生物基因表达的调控;本章内容;6.1 概述;调控机理
核酸分子间的互作
核酸与蛋白质分子间的互作
蛋白质分子间的互作
调控层次
transcriptional level
post—transcriptional level
translational level
post—translational level
转录水平上的调控是最为经济, 灵活,又是最为重要,复杂的调控
;遗传信息表达的方式
组成型表达(constitutive expression), Housekeeping gene
诱导型表达 (inducible expression), Luxury gene
顺、反因子间互作方式的基因表达调控;6.2 操纵子;Operon control model;6.3 乳糖操纵子 (负调控模式);;6.3.1 调控机理 ;阻遏状态;诱导状态;体外结合竞争实验;6.3.2 诱导底物;本底组成型表达;细胞外研究诱导作用时,很少使用乳糖
替代物:
IPTG,异丙基半乳糖苷
TMG ,巯甲基半乳糖苷
ONPG, O-硝基半乳糖苷
;6.3.3 阻遏蛋白的作用机制;阻遏蛋白的结合位点--lacO的结构;Question ;6.3.4 CAP-cAMP复合物在乳糖操纵子表达中的作用----乳糖操纵子的正调控;CAP-cAMP正调空转录的机制;CAP结合位点;CAP的结合对DNA构型的影响;;6.4 半乳糖操纵子;GalR阻遏机理;葡萄糖与乳糖共存时怎么办?;有一个新的问题;gal操纵子的特点;两个转录起始位点的生物学意义;6.5 色氨酸操纵子;6.5.1 转录水平的调控; 通过阻遏物结合操纵子,转录效率降低至1/70;然而细胞中,在阻遏状态下,trp酶系统的酶活却只有1/700,那么,是不是还存在另外一个阻遏系统呢?;6.5.2 翻译水平的调控;前导肽的前后序列结构;4个片段进行配对,形成不同的二级结构;Lack of trp ;;High trp ;衰减子普遍的生物学意义;6.6 ?噬菌体基因表达的调控;λ噬菌体进入细菌细胞以后,可以按裂解或建立溶原两种生活方式生存和繁殖;
在每个菌体内繁殖100个左右的新噬菌体,并裂解细菌释放出来,再度感染其它活菌,称为裂解;
λ噬菌体把自身DNA整合进细菌染色体DNA中,作为细菌基因的一部分,随菌的细胞分裂而增殖,这种生活状态称为溶原;;; cro cⅡ O P Q ;λ噬菌体基因调控过程;λ噬菌体进入溶原周期
CⅠ蛋白与操纵子的亲和力顺序: OR3OR2OR1, OL3OL2OL1;Cro蛋白与操纵子的亲和力顺序: OR3OR2OR1, OL3OL2OL1;
当CⅠ蛋白表达以后,迅速占据OR1与OL1位点,由于这两个操纵子被占据后,RNApol无法起使转录, PL与PR转录被迫终止;
PR不能转录, CⅡ就不能合成,那么CⅠ的合成也将被关闭;这时,结合上OL1的CⅠ会促进PM的转录,当CⅠ过量时, CⅠ便会结合到OL3,而与后者的结合则会影响PM的转录,因此CⅠ始终维持平衡;
CⅡ除了促进CⅠ蛋白的表达,还促进PI启动子的转录,转录翻译出来的整合酶,促进λ噬菌体整和进宿主的染色体DNA,完成溶原过程。;λ噬菌体进入裂解周期
宿主中存在hfl基因,它的表达产物是蛋白CⅡ的水解酶,水解了CⅡ, CⅠ将得不到表达……
而hfl基因的表达受到cAMP-CAP的负调控,存在cAMP-CAP时, hfl基因关闭; 缺乏cAMP-CAP时, hfl基因打开;
没有CⅠ蛋白, Cro蛋白将得到大量积累,而Cro结合于OR3与OL3位点,不影响PL与PR转录的继续进行;
当细胞中有足够的复制蛋白O、P,抗终止蛋白Q以后,噬菌体结构基因A ……J表达,溶菌酶基因得已表达,A蛋白切割cos位点,噬菌体包装后释放出来。
;λ噬菌体选择生活周期的生物学意义;病毒比病毒学家更聪明。病毒在自然界的历史比人类要久远的多,它们更清楚如何在这个世界上生存---
赖明诏(“冠状病毒研究之父”);6.7 真核基因的表达调控; enhancer silencer Attenuater;6.7.1 基因丢失;6.7.2 基因扩增
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