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第三部分食用菌制種
第三章 食用菌制种 第六节 菌种保藏 * * 一、斜面低温保藏法 这是最简单最普通的保藏方法,即将菌种在适宜的斜面培养基上培养成熟后,置于4—5℃的低温下保藏,以后每隔2~3个月转管一次。此法适用于除草菇外的所有食用菌菌种。草菇对低温忍耐力差,它的菌丝体在5℃下即易死亡,因此草菇菌种应保藏在10~13的环境中。若需置于4~5℃的低温下保藏,应在草菇菌苔上灌注3~4mL的防冻剂。一般生产上,草菇多采用室内常温保藏。 斜面低温保藏法 二、液体石蜡保藏法 食用菌菌丝均可用石蜡保藏,一般可保存3年以上,但最好1—2年移接一次,即使不移接,室温下可保藏6~8个月。用此法保藏的菌种不必置于冰箱内,室内比冰箱内保藏效果更好。 二、 菌种的分离 食用菌菌种分离方法有四种,即组织分离法、孢子分离法、耳木分离法和土中菌丝分离法。(其中组织分离法、孢子分离法前面已介绍,这里略讲)。 (一)组织分离法 组织分离法是利用子实体内部组织来获得纯菌种的方法,根据不同的分离材料大体可分为三种。 三、沙土保藏法 此法是将食用菌孢子保藏于干燥的无菌沙土中,保藏期为2一10年。具体方法如下: 1.取河沙过筛(60~80目筛子),除去大沙粒,用10%的盐酸浸泡以除去有机物。盐 酸用量以淹没沙面为宜。浸泡2~4h后,倒去盐酸,用水洗几次,直到接近中性,烘干或晒 干。 2.沙与土比例以2 :l~4 :1为宜,沙过多影响菌种保藏质量,土过多时易结块,接 种后抽干困难。 3.把干沙、土按比例混合压装于安瓿管或小试管,装入量以0.5~lcm为宜,加棉塞, 高压蒸汽灭菌(压力在0.15MPa)灭菌3次,每次30min,干热灭菌(160℃,2h)。待无菌检 查合格后(取少许干沙土放入牛肉汤培养液中,无菌生长)方可使用。 4.用接种环将孢子接于沙土管中拌匀即可。或将孢于接于5mL无菌水的试管中,充分播匀成孢于悬液,然后用lmL无菌吸管吸取孢子悬液加入沙土管中(每管加0.2mL)即可。 5.将接种后的沙土管置于盛有干燥剂(生石灰、氯化钙或硅胶)的容器内,接上0.5KW的真空泵抽气约8h,使沙土基本干燥。 6.经抽样检查,证明无杂菌生长,即可封口进行保藏。 *
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