陈继峰《生物技术制药》第三章基因工程制药4节基因表达.pptVIP

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2017-04-20 发布于浙江
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陈继峰《生物技术制药》第三章基因工程制药4节基因表达.ppt

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上周内容回顾（1）;上周内容回顾（2）;第四节基因表达;;一、宿主细胞的选择（1）;一、宿主细胞的选择（2）;一、宿主细胞的选择（3）;⒈ 原核细胞;大肠杆菌用于基因表达的特点;;;⑵ 枯草芽胞杆菌;;⒉ 真核细胞;;;;大肠杆菌（E. coli）;酵母菌的结构;二、大肠杆菌中的基因表达;;;;;;;; 细菌质粒的生物学特性质粒（Plasmid）的定义：质粒是存在于细菌等微生物细胞染色质以外的共价闭环的双股DNA分子，具有独立自主复制和调控能力，可赋予宿主细胞一定的生物性状。;; 质粒（Plasmid）是存在于细菌染色体外的小型环状双链DNA分子,大小约为数千碱基对。常有1~ 3个抗药性基因，以利于筛选。;;;基因工程制药所用的表达载体必须具备的条件（1）;表达载体必须具备的条件（2）;表达载体必须具备的条件（3）;;;;;;;融合表达质粒pBG-2的结构;⒉ 影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素;产量;;;①启动子的强弱;②核糖体结合位点的有效性;④密码子组成;;;;;;⒊ 真核基因在大肠杆菌中的表达形式;;;;;三、酵母中的基因表达;;;;;;;;;α-因子分泌型表达载体H： Hind Ⅲ位点 B: BamHI 位点 T: 酵母主要蛋白酶加工位点;⒉ 影响目的基因在酵母菌中表达的因素;;;⑵ 外源基因的表达效率　① 启动子必须将外源基因克隆到酵母菌表达载体的启动子和终止子之间，构成“表达框架”。近端启动子含有一个转录所必需的TATA序列和mRNA起始转录位点——起始密码子。终止子区含有终止mRNA转录所需的信号。　;;常用的酵母启动子;;;;;;四、动物细胞中的基因表达;;;第三章基因工程制药思考题（2）;