分子生物学-张晓东-病毒的分子生物学.docVIP

PAGE  PAGE 20 病毒的分子生物学 第一节、研究内容 概念：分子病毒学是用现代分子生物学的新理论、新技术和新方法对病毒基因组的结构和功能，基因组的复制、表达和调控，病毒与宿主的相互作用等进行研究的一门学科。 主要内容如下： 病毒基因组的结构与功能 病毒基因组的复制和表达调控 病毒对宿主细胞的影响 病毒与肿瘤发生 病毒基因工程疫苗及病毒载体 一、病毒基因组的结构与功能 核酸类型： DNA病毒——腺病毒、乙型肝炎病毒等 RNA病毒——反转录病毒、丙型肝炎病毒等 核酸结构：单链、双链、线状、环状 正链RNA 单链 负链RNA 病毒核酸的分子量与细菌相比要小 二、病毒基因组的复制和表达调控 复制 复制：病毒 复制 释放到细胞外 （易感宿主细胞） 表达：转录、翻译 正链RNA病毒： 直接作为模板,复制RNA 同时共有mRNA作用→翻译单一大分子肽链→修饰（蛋白酶降解）结构或非结构蛋白 负链RNA病毒： 不能直接行使mRNA功能→cRNA(互补RNA) →作为模板 必须自身携带依赖RNA的RNA聚合物 反转录病毒： 转录 正单链RNA、以双体形式存在 复制 含有依赖RNA的DNA聚合酶 双链DNA 整合 宿主细胞DNA中 子代病毒核酸 DNA病毒： 大多数为双链DNA 利用宿主细胞本身的转录酶来转录mRNA 早期转录：病毒DNA复制所需要的酶及调节蛋白 调节蛋白 抑制宿主细胞核酸转录和翻译 调控早期或晚期基因的表达 晚期转录：病毒的衣壳蛋白或包膜糖蛋白 病毒翻译的部位：宿主细胞核糖体 所需的原料由宿主细胞提供 三、病毒对宿主细胞的影响 宿主细胞形态、结构的影响 宿主细胞功能 1、病毒对细胞形态、结构的影响 （1）在受体细胞表面表达病毒基因编码的糖蛋白→宿主细胞之间发生融合→巨核合胞体 表达 （2）肿瘤相关病毒 癌蛋白 肿瘤 宿主细胞抑癌基因失活 激活细胞癌基因 (3)引起细胞凋亡（Apoptosis）：如HIV→CD4死亡 2、病毒对宿主细胞功能的影响 特点：  = 1 \* GB3 ①病毒感染细胞后：利用宿主细胞相应的系统完成自身的复制、转录和翻译  = 2 \* GB3 ②病毒早期产物： 抑制宿主细胞的转录 促进病毒早、晚期基因的转录  = 3 \* GB3 ③降解细胞mRNA或与宿主细胞竞争翻译系统来抑制宿主细胞mRNA的进一步翻译→增加病毒mRNA与核糖体亚基的结合效率 降解 病毒mRNA 核糖体 宿主mRNA 蛋白质 四、病毒与肿瘤发生 乙肝病毒→肝癌 EB病毒→鼻咽癌 HIV→kaposi’s肉瘤 五、病毒基因工程疫苗及病毒载体 基因工程疫苗的概念： 利用基因工程的方法（基因重组），将病原微生物的一段基因序列（有较强的免疫原性、无致癌性）克隆在表达载体中，所表达的产物作为抗原，称之为疫苗。用于免疫人体、预防和治疗疾病，这种用基因工程方法产生的疫苗，为基因工程疫苗。 病毒载体： 利用真核病毒的基因组序列元件构建的真核基因转录工具。 病毒经过改造，无致病性 保持原有的功能，即复制、表达和感染宿主细胞 质粒型载体：在细胞中复制，不产生感染性颗粒 分类 假型病毒载体：复制时遗传信息被修改，具有感染性 重组病毒载体：基因重组，具有感染性 第二节 DNA病毒 DNA病毒基因有的为单链、有的为双链，以线状或环状形式存在 例如：乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus, HBV） 腺病毒（Adenovirus） 一、乙型肝炎病毒HBV 为嗜肝DNA病毒，完整的HBV颗粒称为Dane颗粒（圆形） 包膜蛋白——HBsAg 核壳蛋白——HBeAg,HBcAg （一）HBV的基因组和表达： HBV基因组：不完整的小环状双链DNA，约3200核苷酸(3.2kb) 长链（负链）：3.2Kb，固定，完整，一个小缺口 长度不对称 短链（正链）：为长链的50%-100%，链上有长度不等的缺段 有四个开放读码区（ORF）： S基因区：S、前S1 、前S2、编码HBV核壳蛋白 C基因区：C、前C，编码核心蛋白 P基因区：