生物制药课件-第二篇 第一章 基因工程药物 23节.pptVIP

基因工程制药（2）;上次课内容的回顾(1);上次课内容的回顾(2);基因工程制药;第三节 基因工程药物生产 的基本过程;基因工程基本过程;基因工程基本过程;制备基因工程药物的一般程序;基因工程制药的主要程序;;工程菌的发酵工艺不同于传统的抗生素和氨基酸发酵，需要对影响目的基因表达的因素进行分析，并对各种影响因素进行优化，建立适于目的基因的高效表达发酵工艺，以便获得较高产量的目的基因表达产物。为了获得合格的目的产物的产品，需要建立一系列的、相应的分离纯化、质量控制、产品保存等技术。;;基因工程药物的生产过程;一、构建过程示意图;第四节 目的基因的获得;克隆真核基因的方法;为了克隆编码某种特异蛋白质多肽的DNA序列，可以从产生该蛋白质的真核细胞中提取mRNA，以mRNA为模板，在逆转录酶的作用下，反转录合成该蛋白质mRNA的互补DNA(cDNA的第一链)，再以cDNA第一链为模板，在逆转录酶或DNA聚合酶Ⅰ (或者Klenow酶大片段)作用下，最终合成编码该多肽的双链DNA序列。;cDNA克隆示意图;一、逆转录法步骤;; 具备的条件： 较小的蛋白质或多肽的编码基因可以用化学合成法合成。 必须知道目的基因的核苷酸顺序或目的蛋白质的氨基酸顺序。;三、化学合成法（2）;人工化学合成基因的限制（1）;人工化学合成基因的限制（2）;四、其他方法;;2、岛屿获救PCR法 直接从已测序的基因组DNA上寻找编码序列，通过计算机分析找出开放阅读框，采用外显子陷阱法和寻找CpG岛的方法克隆编码基因。 ;;;;;;第三章 基因工程制药思考题（2）