第十一章 抗生素类药物分析幻灯片1.pptVIP

第十一章 抗生素类药物分析;在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。;经化学纯化、精制、化学修饰等过程，最后制成适当制剂。其结构和组成比一般的化学合成药物更为复杂。;特点： 化学纯度较低。原因：同系物多，异构体多，降解物多。 活性组分易发生变异：生物合成时，微生物菌株的变化、发酵条件改变等均可导致产品质量发生变化，如组成或比例发生改变。 稳定性差：抗生素分子结构中含有的活泼基团会发生变化，导致抗生素稳定性变差。 ;分类依据;β–内酰胺类 (青霉素类，头孢菌素类) 氨基糖苷类 (链霉素，庆大霉素，卡那霉素等) 四环素类 (四环素，土霉素等) 大环内酯类 (红霉素，麦迪霉素，螺旋霉素等) 多烯大环类 (两性霉素B等) 多肽类 (放线菌素等) 苯烃胺类 (氯霉素等) 蒽环类 (阿霉素等) 其他 (不属于上述类型的抗生素);仅讨论β–内酰胺类、氨基糖苷类 、四环素类 的理化性质、鉴别反应、杂质检查、含量测定方法和原理，对生物学方法(如异常毒性、热原、降压物质、无菌、生物效价测定法等)不讨论;三、抗生素药物的质量分析：;官能团的显色反应： ?-内酰胺环的羟肟酸铁反应；链霉素的麦芽酚反应，坂口反应。通常有酸根或金属离子或有机碱，需要鉴别。 光谱法：UV，IR。 IR时，对于存在多晶现象的抗生素，有时对照品与供试品图谱或对照图谱不一致，需用相同溶剂同时对供试品和对照品重结晶，使处于相同晶型后再进行测定；若多晶效应是由于研磨和压片过程中的晶相转变所致，则应采用溶液法测定。 色谱法：TLC，HPLC。用标准品作对照。;影响产品稳定性的： 结晶度，酸碱度，水分或干燥失重等。 控制有机和无机杂质的： 溶液的澄清度与颜色，有关物质，残留溶剂，炽灼残渣，重金属等。;3、含量(效价)测定;微生物检定法的优点：;(2) 理化方法;以效价单位表示，指每毫升或每毫克中含有某种抗生素 的有效成分的多少。用单位(u)或微克(?g)表示。;第二节 β-内酰胺类抗生素的分析;β-内酰胺 类抗生素;头孢菌素族;青霉素族;普鲁卡因青霉素;头孢菌素族;头孢他???;头孢硫脒;(1)酸性与溶解性：有游离羧基，酸性强，能与无机碱或有机碱形成盐。碱金属盐溶于水，其水溶液遇酸又析出游离基的白色沉淀。临床常用其碱金属盐（水溶性好）。有机碱盐难溶于水，易溶于甲醇等有机溶剂 (2)旋光性：存在手性碳，具有旋光性。可用于定性和定量分析。 (3)UV吸收特性：头孢菌素族母核有共轭结构，侧链有共轭系统；青霉素族母核虽无共轭结构，但侧链有苯环等取代基。 (4)?-内酰胺环的不稳定性： ?-内酰胺环是结构活性中心，性质活泼，最不稳定。稳定性与含水量和纯度关系很大。干燥条件下性质较稳定(室温条件下密封保存可贮存3年以上)，水溶液很不稳定，随pH和温度不同有很大变化。青霉素在pH6~6.8时较稳定。在酸、碱、青霉素酶、羟胺、重金属离子或氧化剂作用下，易水解，重排，使?-内酰胺环破坏，失去抗菌活性(降解反应见课本p268-269)。;羟肟酸铁反应 类似肽键的反应(茚三酮反应) 其他呈色反应;1、呈色反应;头孢氨苄，头孢羟氨苄，头孢拉定，头孢克洛等有?-氨基酸结构，能显茚三酮反应，显紫色或兰紫色。用于TLC鉴别或检查时作显色剂。 ;2、各种盐的反应;例： (ChP2005)的鉴别方法中头孢拉定的鉴别： 取本品与头孢拉定对照品适量，分别加水溶解并稀释制成每1ml中约含6mg 的溶液，作为供试品溶液与对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅴ B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板[经105℃活化后，置5%(ml/ml)正十四烷的正己烷溶液中，展开至薄层板的顶部，晾干]上，以0.1mol/L枸橼酸溶液-0.2mol/L磷酸氢二钠溶液-丙酮(60：40：1.5)为展开剂，展开，晾干，于105℃加热5分钟，取出，立即喷以用展开剂制成的0.1%茚三酮溶液，在105℃加热15分钟后，检视。供试品溶液所显主斑点的颜色与位置 应与对照品溶液所显主斑的颜色与位置相同。;三、特殊杂质的检查;色谱柱 葡聚糖凝胶柱 流动相A：含3.5%硫酸铵的0.01mol/L磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠2.19g和磷酸二氢钠0.54g，加水1000mL使溶解，调节pH值至7.0） 流动相B：0.01%十二烷基硫酸钠溶液 流速：每分钟1mL； 检测波长：254nm。 对照品溶液的制备 取头孢他啶对照品适量，精密称定，加水制成含头孢他啶100?g/1mL的溶液，摇匀。 测定法 取本品适量，精密称定，加水制成含头孢他啶20mg/1mL的溶液，立即进样200?L，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图；另