沉降菌监测规程预案.doc

沉降菌监测规程 一、目的 建立沉降菌监测方法，规范沉降菌监测操作。 二、范围 适用于西厂区车间洁净室、无菌检查室、阳性室、洗衣房、取样间、微生物室的沉降菌监测。 三、职责 检验中心人员负责车间洁净室、洗衣房、取样间的采样工作；负责各部分所需的材料准备、培养、菌落计数，以及无菌检查室、阳性室、微生物室监测的采样内容的执行。 质量中心负责人负责本规程执行情况的监督检查。 四、内容： 1.仪器与用具 1.1 培养皿（φ90mm） 1.2 恒温培养箱 1.3 高压蒸汽灭菌锅 2.监测程序 2.1 将已准备好的合格的空白培养皿放入物料缓冲间。 2.2 检测人员按人员进入洁净区的要求穿好洁净服，戴好口罩进入洁净室。 2.3 按此《沉降菌监测规程（西厂区）》对环境进行监测。 3.测试规则 3.1测试条件 3.1.1温度和相对湿度 沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温度和相对湿度应与生产工艺等要求相适应（温度控制在18～26℃，相对湿度控制在45%～65%之间）。 3.1.2压差 沉降菌测试前，洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净室（区）之间的压差应当不低于10帕斯卡，空气洁净度级别要求高的洁净室（区）对相邻的空气洁净级别低的洁净室（区）一般要求相对正压。 3.1.3换气次数、空气流速 洁 净 级 别换 气 次 数（风 速）A级0.36-0.54m/sC 级≥25次/hD级≥15次/h3.2测试状态 静态测试：静态测试时，室内测试人员不得多于2人。 动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态下进行的测试。 测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。（在正常的生产操作监测外，可在系统验证、清洁或消毒等操作完成后增加微生物监测。） 3.3测试时间 3.3.1对单向流，如C级背景下的局部A级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。 3.3.2 对非单向流，如C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。 3.4测试方法 采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。 3.4.1采样方法 静态：将已制备好的培养皿按4项的要求及采样点平面图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中0.5h后，再将培养皿盖盖上。 动态：将已制备好的培养皿按4项的要求及采样点平面图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中4h后，再将培养皿盖盖上。动态取样应当避免对洁净区造成不良影响。 3.4.2培养 3.4.2.1全部采样结束后,将培养皿倒置于30℃～35℃恒温培养箱中培养，时间不少于72h。 3.4.2.2用于检测的培养皿应经过预培养合格后使用，为避免运输过程造成影响，在每次取样时，取3个培养皿与其他采样皿同法操作但不暴露采样，然后与采样后的培养皿同时培养，结果应无菌生长。 3.4.3菌落计数 3.4.3.1用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查是否有遗漏。 3.4.3.2若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 3.5 测试人员要求 测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。 静态测试时，室内测试人员不得多于2人。 4.采样点数目及布置 4.1采样次数 每个采样点一般取样一次。 4.2最少采样点数目参照表： 面 积（m2）洁 净 度 级 别A级C级D级＜102～322≥10～＜20422≥20～＜40822≥40～＜1001642≥100～＜20040103≥200～＜400802064001604013注：表中的面积，对于单向流洁净室，是指送风面面积。对于非单向流洁净室是指房间的面积。 4.3洁净区灌装间、配制间的沉降菌取样点监测位置根据《沉降菌取样风险评估报告》确定。不能确定的点根据GB/T 16294-2010和2010版GMP附录要求均匀分布沉降菌的取样监控点，具体分布规则如下： 注： 为采样点 4.4工作区采样点的位置离地0.8～1.5m左右（略高于工作面）。 可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。 4.5 最少培养皿数 满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数。 洁净度级别所需培养皿数（φ90mm） （静态以沉降0.5h计，动态以沉降4h计。）A级14C级2D级25.监测频率 表1： 监测 频次一车间二车间三