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如何从海洋中运用生物技术方法寻找新的酶刘明明.ppt
如何从海洋中运用生物技术方法寻找新的酶
刘明明
2009.5
;;海洋微生物利用现状;传统方法;16SrRNA ;宏基因组学;宏基因组学的研究过程;宏基因组学的技术方法;2. 载体
宏基因组文库的构建需要适宜的克隆载体
通常用于DNA克隆的载体主要包括质粒(Dlasmid)、粘粒
(cosmid)和细菌人工染色体(BAC)等。
质粒一般用于克隆小于10 kh的DNA片段,适用于单基因的克隆与表达。
粘粒(大部分是用pWE15载体,插入片段在40 kh左右)和细菌人工染色体(插入片段可达350 kb)已被广泛地用于大插入片段文库的构建中,以期获得由多基因簇调控的微生物活性物质的完整的代谢途径;
;3.宿主
大肠杆菌(E.coli)依然是最理想的克隆和表达宿主.
青链霉菌(Streptomyce li idans)和其他??革兰氏阴性菌.
一些缺陷突变体也可作为宿主来进行文库的功能筛选
;筛选方法; 宏基因组学 在海洋微生物中发现新酶的应用; 挑战和未来的发展方向;结论;Thank you for your attention!!!
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