基于核酸适配体的微流控芯片酶反应器用于蛋白质的分析_肖鹏.pdfVIP

年 月 ２０１２ １１ Ｖｏｌ．３０　Ｎｏ．１１ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１２　 Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ １１２７～１１３２ 研究快报 ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１２．０７０１９ 基于核酸适配体的微流控芯片酶反应器用于蛋白质的分析 肖 鹏 李大雷 满 燕 耿利娜 吕雪飞 邓玉林 　 ，　 ，　 　 ，　 ，　 ，　 ＊ 北京理工大学生命学院 北京 （ ， １０００８１） 摘要 将??酸适配体作为胰蛋白酶固定化介质 制备了一种新型的微流控芯片酶反应器 并与高效液相色谱 串联 ： ， ， － 质谱联用，搭建了在线分析平台；分别使用标准蛋白及混合蛋白样品对芯片的酶解效率及联用平台的分析能力进 行了初步评价 结果表明 肌红蛋白经该平台分析后肽段覆盖率可达到 对 混合蛋白进行 次平 。 ，５　ｎｇ ３７％； ５００　ｎｇ ３ 行分析 肽段覆盖率及相对标准偏差分别为 牛 血 清 白 蛋 白 肌 红 蛋 白 和 ， ４４．３％、６．５％（ ），６５．０％、２．７％ （ ） ６２．０％、 细胞色素 初步实验表明 该在线分析平台具有检测灵敏度高 重现性好 酶解效率高的特点 有望在蛋白 ５．６％（ ｃ）； ， 、 、 ， 质组学分析中发挥重要作用。 关键词 高效液相色谱 串联质谱 胰蛋白酶 蛋白质 核酸适配体 芯片酶反应器 ： － ； ； ； ； 中图分类号 文献标识码 文章编号 ：Ｏ６５８　　　 ：Ａ　　　 ：１０００－８７１３（２０１２）１１－１１２７－０６ Ａｎ　ｅｎｚｙｍｅ　ｒｅａｃｔｏｒ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ａｐｔａｍｅｒ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ　ｃｈｉｐ　ｆｏｒ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ａｎａｌｙｓｉｓ ＸＩＡＯ　Ｐｅｎｇ，ＬＩ　Ｄａｌｅｉ，ＭＡＮ　Ｙａｎ，ＧＥＮＧ　Ｌｉｎａ，ＬＸｕｅｆｅｉ，ＤＥＮＧ　Ｙｕｌｉｎ＊ （Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉ