T细胞检测技术2013选编.ppt

T细胞检测技术; 机体接受外来抗原及自身抗原刺激后，通过细胞免疫和体液免疫及相关系统协同作用，对抗原产生应答。; 淋巴细胞;（1）形态学检测 ;方法学评价;（2）3H-TdR掺入法（MTT法）; 原理： CFSE等染料可连结到细胞内蛋白的氨基酸群（PKH26能插入脂膜），并随细胞分裂而分配到子代细胞中，每分裂一次，荧光强度减少一倍。 方法学评价 优点：操作简单；重复性强；安全； 缺点：CFSE可能干扰细胞增殖 ;二、T细胞分泌功能的检测;1、生物活性检测;2、免疫学检测;优点：简单，适用性广，应用特异的单克隆抗体，可检测单一细胞因子的含量； 缺点：无法反应细胞因子的生物活性；不同单克隆抗体检测的结果不同；敏感性稍差（100pg）;（1）Realtime-PCR （2）分子杂交;三、T细胞介导的细胞毒实验;1、51Cr释放实验;2、IC Assay（In vivo cytotoxicity Assay）;四、T细胞表面标志的检测;1、Tetramer技术;2、表面标志CD107a/b的检测;谢 谢