食品微生物8微生物分离、纯化与保藏教程.pptVIP

;（1）学习并掌握微生物分离纯化的原理和分离纯化的技术。 （2）学习从样品中分离、纯化出所需菌株。 ;二、实训原理;三、实验材料;取样 制备稀释液 分离;1、倾注平板法;2、涂布分离法;1.斜线法 2.曲线法 3.方格法 4.放射法 5.四格法;利用选择培养基 创造只让所需微生物生长的条件，所需微生物有效地与其他微生物竞争，在生长能力方面远远超过其他微生物。 所创造的条件包括选择最适的碳源、能源、温度、光、pH、渗透压和氢受体等。经过多次重复移种，最后富集的菌株很容易在固体培养基上长出单菌落。 如分离专性寄生菌，须把样品接种到相应敏感宿主细胞群中，使其大量生长。多次重复移种便可得到纯的寄生菌。 ;利用装原培养基的试管作培养容器，在沸水浴中加热数分钟，逐出培养基中的溶解氧。快速冷却，并进行接种。 加入无菌的石蜡于培养基表面，使培养基与空气隔绝。或在接种后，用N2或CO2取代培养基中的气体，然后在火焰上试管口密封。 为了更有效地分离某些厌氧菌，可把所分离的样品接种于培养基上，然后再把培养皿放在完全密封的厌氧培养装置中。;五、实训结果;1、微生物菌落特征 1）肉眼观察 ;2、微生物生理生化反应 ;思考与讨论 ;广东食品药品职业学院 食品科学系;菌种的保藏与菌种管理;菌种退化：菌种在自发突变的影响下，引起某些优良特性降低或丧失的现象。 菌种衰退原因：基因突变;二、菌种的复壮;(一)菌种的提纯 ;(二)通过寄主体进行复壮 ;(三)淘汰已衰退的个体;三、菌种保藏;保藏菌种的选取：选取优良的纯菌种，最好是用其分生孢子或芽孢等休眠体，在其休眠和停止生长的条件下保藏。;(三)菌种保藏方法：;1.斜面低温保藏法－－常用保藏法;简便易行 容易推广 存活率高；;沙土管的准备： 河(海)沙过24目筛，10％盐酸浸泡24h，去盐酸，水冲洗至pH中性，去水烘干或晒干。取菜果园土粉碎过筛，烘干。 沙土按3：2或1：1混合装入指形管或高100mm，直径为10mm的小试管，高约1cm(约2g)，塞棉塞121℃湿热灭菌1h，也可170℃2h干热灭菌(或蒸汽三次间歇灭菌)，烘干。 经肉汤检查确实证明无菌即可使用。;菌种;砂土管保藏??的特点;砂土管保藏法的优点;3、矿油保藏法（石蜡油低温保藏法） ;矿油保藏法特点：;4、真空冷冻干燥法 ;真空冷冻干燥法优点： 具低温、干燥、除氧主要因素，适用于除丝状真菌的菌丝体外的其它各类微生物。 菌种存活时间长、效果好，一般可保存5年以上，有的可保藏15年以上不发生变异。 体积小、不易污染、便于运输，为最广泛的菌种保藏法。;冷冻真空干燥操作流程;5、滤纸保藏法 ;不同的保存方法都有一定的不足，因此， 尽量同时用多种方法保存;（四）微生物的保藏机构;中国科学院典型培养物保藏委员会;中国工业微生物菌种保藏中心;中国微生物菌种包藏管理条例 病原微生物实验室生物安全管理条例 动物病原微生物菌（毒）种包藏管理办法