蛋白質小结.pptVIP

生物化学;;蛋白质的分子组成;蛋白质的含氮量;——蛋白质的基本组成单位;H;非极性疏水性氨基酸;2. 极性中性氨基酸;3. 酸性氨基酸;　;pH=pI;2. 等电点（pI）;氨基酸等电点的计算 公式：pH=(pKn+pKn+1)/2 　　　n：氨基酸（或多肽）完全质子化时带正电荷基团数 　　　pK：解离基团的解离常数等电点的计算步骤 先将氨基酸/多肽可解离基团的pK值自小到大按顺序排列 判断n值 判断氨基酸的分类 酸性氨基酸和中性氨基酸的完全质子化数 n=1 碱性氨基酸的完全质子化数 n=2 ;组成天然蛋白质分子的20种氨基酸中，只有色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸对紫外光有光吸收。其吸收峰在280nm左右，以色氨酸吸收最强。 可利用此性质采用紫外分分光度法测定蛋白质的含量。 ;4. 茚三酮反应（α-氨基的反应）;* 肽键（peptide bond）：是由一个氨基酸的?-羧基与另一个氨基酸的?-氨基脱水缩合而形成的化学键。;多肽链;蛋白质的分子结构包括： 一级结构 (primary structure) 二级结构 (secondary structure) 三级结构 (tertiary structure) 四级结构 (quaternary structure);蛋白质的一级结构; 蛋白质的二级结构;1. ?-螺旋;;1）极大的侧链基团（存在空间位阻）； 2）连续存在的侧链带有相同电荷的氨基酸残基（同种电荷的互斥效应）； 3）有Pro等亚氨基酸存在（不能形成氢键）； 4） Gly:由于自由度过大而不稳定。 ;2. ?-折叠;3. ?-转角;4. 无规卷曲;;蛋白质的三级结构;结构域 （domain） ;蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用，称为蛋白质的四级结构。;维系蛋白质四级结构的是疏水键、van der Waals力、氢键、盐键等非共价键。亚基之间的结合力主要是氢键和离子键。 在一定的条件下，四级结构的蛋白质可分离为其组成的亚基，亚基本身构象仍可不变，但并不具有生物活性。 ; 一级结构决定空间结构 （1）一级结构决定空间结构：同一蛋白质不同状态的比较。 【范例】蛋白变性与复性 （2）保守序列、保守氨基酸改变，功能改变；保守氨基酸不变，功能不变。 【范例】分子病 （3）不同蛋白质之间的比较：结构相似功能相似（氨基酸序列提供重要的生物进化信息）、不同结构不同功能; 天然状态，有催化活性; 这种由蛋白质分子发生变异所导致的疾病，称为“分子病”。; 空间结构是蛋白质生物活性的基础【范例】酶蛋白变性与复性;空间结构（特定区域）体现生物活性；空间结构的灵活性，体现了生物活性的可调节特性。【举例】别构效应 空间构象并非生物活性的唯一影响因素 【举例】低温下酶活性低，但并不影响构象；盐析时沉淀的酶无活性，但构象不变。;3. 蛋白构象疾病： 错误构象相互聚集，形成抗蛋白水解酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病。 【举例】 老年痴呆 亨汀顿舞蹈病 疯牛病;两性电离（pI）;蛋白质的胶体性质 ;蛋白质的变性、沉淀和凝固 ; 应用举例 临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。 ;* 蛋白质沉淀 　　在一定条件下，蛋白疏水侧链暴露在外，肽链融汇相互缠绕继而聚集，因而从溶液中析出。 变性的蛋白质易于沉淀，有时蛋白质发生沉淀，但并不变性。 ; 变性蛋白质不一定沉淀 沉淀蛋白质不一定变性 沉淀蛋白质也不一定凝固 但凝固的蛋白质一定已变性，且为不可逆变性;若蛋白质变性程度较轻，??除变性因素后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性。;蛋白质的分离纯化;3. 电泳 根据性质：蛋白质的两性解离 作用机理：异性电荷互相吸引 影响因素：电荷种类及数量、分子大小及形状 溶液离子强度及pH等