产耐盐蛋白酶深海细菌的分离鉴定产耐盐蛋白酶深海细菌的分离鉴定.pdf

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2015, Vol.31, No.3 产耐盐蛋白酶深海细菌的分离鉴定 赵谋明，舒会，崔春，雷芬芬，唐雪鹭 （华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640） 摘要：本文采用高盐富集、复筛发酵及耐盐稳定性实验的方式，从深海海泥中筛选产耐盐蛋白酶的深海海洋细菌。从深海海洋 微生物中共筛选出 25 株耐盐菌，在这 25 株菌株中有 14 株在酪蛋白平板上能产生较大的水解圈；通过发酵复筛及耐盐稳定性实验， 筛选得到一株酶活性能高且耐盐稳定性好的菌株，将其编号为 SWJSS3；对菌株 SWJSS3 进行 16S rDNA 的鉴定并初步研究了盐浓度 对产酶情况和酶稳定性的影响。菌株 SWJSS3 在 0~10% (m/V）的盐浓度条件下均能生长，在 0~10%的盐浓度下，菌液 OD600 的吸光 值范围为 0.08-1.98；通过发酵复筛其所产生的蛋白酶酶活在盐浓度为 1%时达最高，为 233.56±2.16 U/mL；所产蛋白酶在终浓度为 15% (m/V)的 NaCl 溶液下，混匀 4 ℃保存 1 h，残余酶活为初始酶活的 40.70±2.06%，继续存放一段时间到第 9 h，酶活基本保持不变；通 过 16S rDNA 鉴定其为铜绿假单胞菌，与 Pseudomonas aeruginosa RP28 16S rDNA 的相似性达到 99%以上。 关键词：深海海洋细菌；蛋白酶；耐盐稳定性；分离鉴定 文章篇号：1673-9078(2015)3-50-54 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.3.009 The Isolation and Identification of Deep-sea Bacteria That Produce Salt-tolerant Proteases ZHAO Mou-ming, SHU Hui, CUI Chun, LEI Fen-fen, TANG Xue-lu (College of Light Industry and Food Science, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) Abstract: This study was aimed at screening deep-sea bacteria that produce salt-tolerant proteases from deep-sea mud samples based on high-salt accumulation, fermentation rescreening, and salt-tolerant stability tests. Twenty-five strains of deep-sea marine microorganisms were selected, 14 of which demonstrated an increase in hydrolysis cycles on casein plates. A strain with high enzyme activity and salt stability was obtained based on fermentation rescreening and a salt-tolerance test, and was labele