紫杆柽柳cDNA文库构建与硫氧还蛋白基因的克隆.pdfVIP

分子植物育种!!# 年!第 ! 卷!第 $ 期!第 %%’ %( 页 )*+,-.+/012+/34150,,673891!#91:*+;!91*;$91%%’ %( 研究报告 =?@=AB1=2C=D 紫杆柽柳 -E@ 文库构建与硫氧还蛋白基因的克隆 王玉成 F1 杨传平 刘桂丰 姜静 东北林业大学林学院91哈尔滨91G$# H 通讯作者911I/38J.-K,38G!LMJ/K**;-*N;-3O 摘要 以 胁迫的紫杆柽柳 为材料建立了 文库 经检测 文库的初始滴度 /BAC( !#$% ’($)**)+%%# -E@ $ ! 为 $;!G$PQ.!重组率为 L%R!插入片段的长度在 ;(S(;TU 之间!平均长度为 G;!TU!扩增后文库的滴度为 #;!GLPQ.VN+$ 对文库克隆进行随机测序!获得了紫杆柽柳的硫氧还蛋白 DK7*0,6*W73% 基因序列$ 生物信息 学分析表明获得的硫氧还蛋白基因全长 %X(UP!其中 $Y 非翻译区长 $%UP!(Y 非翻译区长 !#UP!开放读码框 长 #!(UP!编码 G# 个氨基酸!蛋白的分子量为 G$;GTE!理论等电点为 $;$L!其氨基酸序列中具有硫氧还蛋 白的保守活性位点 ZA[2A’序列!A+.\4/+ 分析表明该硫氧还蛋白与蓖麻( ,%-%’.* -)##.’%*# 的硫氧还蛋白 氨基酸序列同源性高!达 %$R$ 本研究构建的 -E@ 文库为柽柳基因克隆和系统研究柽柳抗逆分子机理奠 定了基础$ 关键词 紫杆柽柳!-E@ 文库!硫氧还蛋白!基因克隆 A*3\40.-47*31*Q1!#$% ’($)**)+%% -E@1]7U0/0J1/361A+*37381*Q1DK7*0,’ 6*W731[,3, Z/381^.-K,38HO ^/38OAK./3P738O ]7.O[.7Q,38O _7/38O_738 ‘*0,\4OA*++,8,9O*04K,/\4O‘*0,\40JOa37b,0\74J9OB/0U739OG$# HOA*00,\P*36738O/.4K*09OI/38J.-K,38G!LMJ/K**;-*N;-3 @5?D=@AD @O-E@O+7U0/0JOI/\O-*3\40.-4,6OQ0*NO4K,O47\\.,O*QO!#$% ’($)**)+%% 40,/4,6OI74KO/BAC(;ODK,O+7U0/0JO P07N/0JO474,0OI/\O$;!G$PQ.9O/36O4K,O0/4,O*QO0,-*NU73/47*3OI/\OL%R9O4K,O/b,0/8,O\7c,O*QO73\,04\OI/\OG;!TU9O4K,O 474,0O*QO/NP+7Q7,6O+7U0/0JOI/\O#;!GLPQ.VN+;O@O4K7*0,6*W73O8,3,OI/\O*U4/73,6O4K*.8KO0/36*N+JO\,d.,3-738O4K,O +7U0/0JO-+*3,\9OIK7-KO\K*I,6O4K,0,OI,0,O/O3.NU,0O*QOQ.++’+,384KO8,3,\O73O4K,O-E@O+7U0/0J;ODK,O4K7*0,6*W73O8,3,O *U4/73,6OI/\O%X(UPO73O+,384K9O73-+.6738O$%UPO*QO$YO.340/3\+/4,6O0,87*3O/36O!#UPO*QO(YO.340/3\+/4,6O0,87*39O74OK/6O /O*P,3O0,/6738OQ0/N,O*QO#!(UP9OIK7-KO-*34/73,6O/O6,6.-,O/N73*O/-76O\,d.,3-,O*QOG#O0,\76.,\;ODK,OP0*4,73Y\O N*+,-.+/0O I,78K4O I/\O G$;GTE9O 74\O 7\*,+,-407-O P*734O I/\O $;$L9O /36O K/6O 4K7*0,6*W73Y\O -*3\,0b,6O /N73*O /-76O \,’ d.,3-,O*QO ZA[2A’;OA+.\4/+O0,\.+4O0,b,/+,6O4K/4O4K7\O8