兽医生物技术学.ppt

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兽医生物技术学 专业学位课程 (3学分); 内 容;第一讲 基因分子生物学;分子生物学简史;Nature, 1953, 171: 737-738;20种氨基酸构成蛋白质;4种核苷酸构成DNA.;第一次基因重组;动、植物界发生了巨大变化;;;基因组学;生物信息学; 1.1 遗传学中心法则;DNA的结构;DNA的化学组成与一级结构 单核苷酸由三部分组成: 戊糖、磷酸和碱基。 核苷酸通过 3’,5’-磷酸二酯键连接成线 型大分子(多核苷酸链)。 多核苷酸链(polynucleotide chain) 是核酸(DNA和RNA)结构的基础。 ; 在核苷酸分子中,戊糖的?-半缩醛羟基与碱基中的氢(嘧啶环1位,嘌呤环9位上的氢)失水缩合成N-苷键而形成核苷; 核苷的5’位与磷酸通过酯键形成5’-核苷键。 不同的核苷酸用碱基第一个字来命名。 核苷酸分子的碱基类似于蛋白质氨基酸的侧链,它们影响着所形成的核酸的结构和功能。 ;; 核苷酸通过 3’,5’-磷酸二酯键连接成线 型大分子(多核苷酸链)。 多核苷酸链(polynucleotide chain) 是核酸(DNA和RNA)结构的基础。 ;;;简写:;;DNA的双螺旋结构 构成DNA的两条多核苷酸链的磷酸-戊糖骨架盘旋成直径为2nm的双螺旋,由于脱氧核酸中连接碱基的C1并不正好处在螺旋的相对位置上,故两股链在螺旋轴上的间距并不相等,从而在分子表面形成宽窄不等的大沟(major groove)和小沟(minor groove)。 双股多核苷酸链上的碱基则位于螺旋的内部,大沟垂直于螺旋轴,相邻碱基的间隔为0.34nm;每一匝螺旋含10bp,其轴向距离为3.4nm。每一匝螺旋转动360 ?C,故相邻碱基对间转动36?C。;; DNA双螺旋中,碱基的配对关系是严格的: 腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)配对, 鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)配对, 故 A/T=G/C=1 碱基的这种严格配对关系基于两方面的因素: 一是形成氢键的基团在空间的取向; 二是碱基对的大小能容纳于双螺旋中。 由于双股链是反平行的,其立体化学取向正好相反,这就使双螺旋的外形,无论从何端观察都相同,呈现出二重对称性。;;; 所有生物种的双股DNA中,A和T含量相等,G和C的含量相等. DNA的???基组成一般可用其GC含量来表示G+C (?)。 同一物种所有细胞DNA的GC含量都相同,而种间的差异则很显著: 细菌间,可从0.3-0.7。 高等生物的GC含量一般都小于0.5。;DNA的热变性 DNA的生物功能依赖于其结构。当双螺旋DNA加热至生理温度以上(接近100 °C)时,DNA双股链间的氢键断裂,最后双股链完全分开并成为无规线团。这一过程叫DNA的变性(denaturation)或融解。 ;融解温度(Tm) 在DNA的热变性过程中,260nm的吸收值缓慢上升,到达某一温度后即骤然上升,故称为增色效应 。 吸收值增加的中点称为融解温度(Tm)。在接近生理条件下,DNA的Tm一般在85-95°C DNA的Tm为多种因素所影响: G+C含量(G+C含量高,Tm也高); 溶液的离子强度(标准条件是0.18mol/l Na+) 甲酰胺、尿素等可降低Tm 溶液pH值;;DNA的复性 热变性的DNA如缓慢冷却,已分开的 互补链又可能重新缔合成双螺旋。 热变性后缓慢冷却的过程叫做退火。 DNA的变性和复性是可逆的。;RNA的结构 1、化学组成 碱基:与DNA的区别是将胸腺嘧啶(T)换成了尿嘧啶(U); 核糖,而不是DNA的2-脱氧核糖。 2、化学结构 一个核苷酸的3’-OH基团与第二个核苷酸的5’-磷酸基团发生反应,形成磷酸二酯键,依次连接成为多核苷酸链 ——这一点与DNA相同。;;; RNA形成大分子后的结构 与DNA不同,RNA几乎常常是单链 有的RNA分子有确定的结构 (tRNA常形成三叶草结构) 有的则结构不太确定,也不十分稳定。 几乎每个RNA分子都有许多短的双螺旋区, 因为在一条RNA链的发夹结构之内碱基对以 反平行方向靠氢键结合之故。 另外也有一些环状的RNA分子。;;成熟tRNA的三叶草结构;从DNA到蛋白质;遗传密码;;

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