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基因工程复习题基因工复习题
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一、名词
基因工程:按照人们的愿望,进行严密的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术有目的地改造生物种性,使现有的物种在较短的时间内趋于完善,创造出更符合人们需求的新生物类型。
基因工程工具酶:指体外进行DNA合成、切割、修饰和连接等系列过程中所需要的酶,包括DNA聚合酶、限制性核酸内切酶、修饰酶和连接酶等。
基因工程药物:主要指基因工程活性多肽、基因工程疫苗和DNA药物等。
Tm:DNA达到50%变性的温度。
复性:高温变性的DNA被逐渐冷却时,分开的两条链又会重新结合成双链DNA。
杂交:
复制起始位点:每一种生物DNA的复制总是从特定的位点开始,这个位点具有一定的核苷酸序列,这个序列就叫复制起始位点。
复制子:从复制起始位点开始复制出一个DNA分子或一个DNA片段的核苷酸序列称为复制子。
启动子:是一段提供RNA聚合酶识别和结合的DNA序列,它位于基因的上游。
SD序列:在原核生物结构基因的起录点下游不远处,总有一个5’-AGGAGG-3’的序列,转录出mRNA上的5’-AGGAGG-3’序列,与核糖体30s亚基16SrRNA3`端的5`-CCUCCU-3`互补,成为30S亚基识别和结合mRNA的位点。这个序列就叫SD序列。
基因编码区:转录mRNA上起始密码AUG至休止密码UAG或UAA、UGA的各种遗传密码的核苷酸序列。
转录终止子:在基因编码区下游有一段使转录终止的核苷酸序列。
限制性核酸内切酶:是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并使每一条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
稀切酶:那些长的识别序列和富GC或富AT的识别序列在DNA分子中出现的概率很低,所以把这些识别序列相应的限制性核酸内切酶称稀切酶。
同裂酶:有一些限制性核酸内切酶虽然来源不同,但是具有相同的识别序列。这样的限制性核酸内切酶成为同裂酶。
粘性末端:两条多聚核苷酸链上磷酸二酯键断开的位置是交错的,对称得分布在识别序列中心位置的两侧。这样的切割的结果,使DNA片段末端的一条链多出一至几个核苷酸,同时具有互补核苷酸的另一DNA片段末端可以连接,这样的DNA片段末端叫做粘性末端。
平末端:两条多聚核苷酸链上磷酸二酯键断开的位置处在识别序列的对称结构中心。这样的切割的结果产生的DNA片段末端是齐平的。
同尾酶:有些限制性核酸内切酶虽然识别序列不同,但是切割DNA分子所得的DNA片段具有相同的黏性末端,称这样的一组限制性核酸内切酶为同尾酶。
Star活性:有些限制性核酸内切酶在特定条件下可以在不是原来的识别序列处切割DNA这种现象称为STAR活性。
部分酶切:选用的限制性核酸内切酶对其在DNA分子上全部识别序列进行不完全的切割。
限制性图谱:当一种DNA分子的核苷酸序列被全部测定后,意味着此DNA分子上所有的限制性核酸内切酶识别序列也已经全部知道,可以绘制出DNA分子上每种限制性核酸内切酶的识别序列的分布图。
PCR:是模仿细胞内发生的DNA复制过程进行的,在体外由酶催化合成特异性DNA片段。
寡核苷酸连杆:是一种按预先设计,化学而成的寡核苷酸片段。一般由8—12个核苷酸组成,以中线为轴,两侧互补对称。其上有一种或几种限制性核酸内切酶的识别序列,是连接了寡核苷酸连杆的DNA片段经过这些限制性核酸内切酶切割后,可以产生一定的黏性末端,便于与具有相同黏性末端的另一DNA片段连接。
多克隆位点:
MCS连杆:MCS这样的连杆被称为多克隆位点寡核苷酸连杆或简称MCS连杆。
衔接头:是一种化学合成的寡核苷酸,含有一种以上的限制性核酸内切酶的识别序列。
DNA芯片:是DNA片段以预先设计的排列方式固定在载玻片或尼龙膜上而组成的密集分子排列。
DNA连接酶:能催化双链DNA片段紧靠在一起的3`羟基末端与5`磷酸基团末端之间形成磷酸2酯键。
基因克隆载体:是以质粒DNA分子为基础构件而成的克隆载体,主要用于原核生物和植物的基因转移以及建立基因组文库和cDNA基因文库。
质粒:一种寓于宿主细胞中染色体外裸露的双链DNA分子。
严紧型质粒:拷贝数少的质粒。
松弛型质粒:拷贝数多的质粒。
亲和性质粒:把能同寓于细胞中的不同质粒成为亲和性质粒。
不亲和性质粒:不能同寓于一个细胞中的质粒。
不相容质粒:既不亲和质粒。
接合质粒:含有tra基因的质粒。
非接合质粒:不含有tra基因的质粒。
质粒迁移作用:部分质粒虽不含tra基因,但含有bom位点,当宿主细胞内同时存在含有mob基因的辅助质粒时,mob基因的产物可打开非接合质粒的oriT位点,借助于接合质粒tra基因的产物,使非接合质粒被动迁移到受体细胞中,这个现象叫质粒迁移作用。
显性质粒:质粒除了与控制本身复制和转移相关的基因外,有的质粒还携带一些其他的基因,宿主细胞由于含有
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