河北省唐山市开滦第二中学高中生物 2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案 新人教版选修1.docVIP

PAGE  河北省唐山市开滦第二中学高中生物 2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案 新人教版选修1 班级： 姓名： 小组： 【学习目标】 1、研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。 2．能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。 【重点难点】 重点：能利用选择培养基分离细菌 难点：运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。 【自主学习】 一、研究思路 1．1筛选菌株 (1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 或 其他微生物生长。 (2)选择培养基：在微生物学中，将允许 种类的微生物生长，同时 和 其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 1. 2 统计菌落数目 （1）测定微生物数量的常用方法有 和 。 （2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理 当样品的 足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。 此外，测定微生物数量的常用方法还有 直接计数。 1. 3 设置对照 设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的 。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养 的培养基作为空白对照。 二、实验设计 2．1 实验设计的内容包括实验方案、 、实施步骤和 等。 2．2实验流程： 配制土壤溶液系列稀释涂布平板与培养菌落计数 2．3 土壤微生物主要分布在距地表 的近中性土壤中，约 为细菌。 2．4 分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同 不同，其目的是保证获得菌落数在 之间、适于计数的平板。细菌稀释度为 ，放线菌稀释度为 ，真菌稀释度为 。 2．5 培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在 ℃培养1～2d，放线菌一般在25～28℃培养 d，霉菌一般在 ℃的温度下培养 d。 2．6 在菌落计数时，每隔 h统计一次菌落数目。选取菌落数目 时的记录作为结果，以防止因培养 而导致遗漏菌落的数目。 2．7菌落的特征包括 等方面。 2．9 实验过程 1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要 2）应在火焰旁称取土壤 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的 中，塞好棉塞。 3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在 旁进行。 4）实验时要对培养皿作好标记。注明 、培养时间、稀释度、 等。 3．结果分析与评价 3．1　对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助 化学 的方法。 3．2　在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 将尿素分解成了 。氨会使培养基的碱性 ，PH 。因此，我们可以通过检测培养基 变化来判断该化学反应是否发生。 3．3　在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变 ，说明该细菌能够 。 实验方案 土壤中尿素分解菌的分离 与计数 分离筛选微生物的原理 有利于目的菌株生长 抑制或阻止其他微生物生长 人为 条件 微生物计数方法与原理 稀释涂布平板法 显微镜直接计数 对照设置与重复设置 实验设计 实验操作 结果与分析 （三）课堂总结、点评 【 【问题生成】 同学们，通过你的自主学习，你还有哪些疑惑，请把问题填写在下面 【师生互动、问题探讨】 土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么？ 2.如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？ 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？ 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？ 【课堂小结与反思】 【自我检测】 2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水 C．K