2第二章 蛋白质.ppt

蛋白质的生物学意义 ;蛋白质的结构与功能;一、什么是蛋白质?;二、蛋白质的生物学重要性;1）作为生物催化剂（酶） 2）代谢调节作用 3）免疫保护作用 4）物质的转运和存储 5）运动与支持作用 6）参与细胞间信息传递;蛋 白 质 的 分 子 组 成The Molecular Component of Protein;? 组成蛋白质的元素; 各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％。 ;一、氨基酸 —— 组成蛋白质的基本单位;H;非极性疏水性氨基酸 极性中性氨基酸 酸性氨基酸 碱性氨基酸;甘氨酸 glycine Gly G 5.97;色氨酸 tryptophan Try W 5.89;天冬氨酸 aspartic acid Asp D 2.97;几种特殊氨基酸;? 半胱氨酸 ;（二）氨基酸的理化性质;pH=pI;2. 紫外吸收 ;3. 茚三酮反应 ;二、肽;+;* 肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。;N 末端：多肽链中有自由氨基的一端 C 末端：多肽链中有自由羧基的一端;N末端;（二） 几种生物活性肽;GSH过氧化物酶;三、蛋白质的分类 ;蛋 白 质 的 分 子 结 构The Molecular Structure of Protein;蛋白质的分子结构包括 一级结构(primary structure) 二级结构(secondary structure) 三级结构(tertiary structure) 四级结构(quaternary structure);定义 蛋白质的一级结构指多肽链中氨基酸的排列顺序。;一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础。;二、蛋白质的二级结构;（一）肽单元;; 蛋白质二级结构的主要形式;（二） ?-螺旋;;螺旋上升一周包含3.6个氨基酸残基；每个残基沿轴旋转100。；每两个残基之间的距离为0.15nm；螺距0.54nm; ?-螺旋中氨基酸残基侧链伸向外侧，相邻的螺圈之间形成氢键，氢键的取向几乎与轴平行。 ?-螺旋有左手螺旋和右手螺旋两种。天然蛋白质的?-螺旋多为右手螺旋。;氨基端;蛋白质的结构－－二级结构;多肽链呈锯齿状（或扇面状）排列成比较伸展的结构； 相邻两个氨基酸残基的轴心距离为0.35nm，侧链R基团交替地分布在片层平面的上下方，片层间有氢键相连； 有平行式和反平行式两种。;（四）?-转角和无规卷曲;蛋白质的结构－－二级结构;三、蛋白质的三级结构;; 肌红蛋白 (Mb) ;纤连蛋白分子的结构域 ;（三）分??伴侣;亚基之间的结合力主要是疏水作用，其次是氢键和离子键。;血红蛋白的四级结构 ;;共价键;氢键 ;疏水作用 ;范德华力 ;蛋白质结构与功能的关系 The Relation of Structure and Function of Protein;（一）一级结构是空间构象的基础 ;（二）一级结构与功能的关系;（一）肌红蛋白与血红蛋白的结构 ;疯牛病中的蛋白质构象改变 疯牛病是由朊病毒蛋白(prion protein, PrP)引起的一组人和动物神经退行性病变。 正常的PrP富含α-螺旋，称为PrPc。 PrPc在某种未知蛋白质的作用下可转变成全为β-折叠的PrPsc，从而致病。;第三节;（一）蛋白质的两性电离 ;（二）蛋白质的胶体性质 ;+;（三）蛋白质的变性、沉淀和凝固 ; 造成变性的因素 如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等 。 ; 应用举例 临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。 此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。 ;若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性(renaturation) 。; 天然状态，有催化活性;* 蛋白质沉淀 在一定条件下，蛋白疏水侧链暴露在外，肽链融会相互缠绕继而聚集，因而从溶液中析出。 变性的蛋白质易于沉淀，有时蛋白质发生沉淀，但并不变性。 ;（四）蛋白质的紫外吸收;（五）蛋白质的呈色反应;二、蛋白质的分离和纯化;（二）丙酮沉淀、盐析及免疫沉淀 ;* 免疫沉淀法：将某一纯化蛋白质免疫动物可获得抗该蛋白的特异抗体。利用特异抗体识别相应的抗原蛋白，并形成抗原抗体复合物的性质，可从蛋白质混合溶液中分离获得抗原蛋白。 ;（三）电泳;几种重要的蛋白质电泳 *SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于蛋白质分子量的测定。 *等电聚焦电泳，通过蛋白质等电点的差异而分离