第一章基因工程第一节工具酶的发现.ppt

第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生;转让人胰岛素基因的大肠杆菌;一、基因工程;首只转基因猪产生;;;基因工程诞生的理论基础:; 2.基因工程诞生的理论基础; 3.基因工程创建的技术保障;限制性核酸内切酶;一.限制性核酸内切酶（限制酶） ;1、限制性核酸内切酶的概念：;2、特点：具有专一性 （一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列， 并在特定的切点上切割DNA分子）;;什么叫粘性末端？;*什么叫平末端？;要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个粘性末端？;基因的针线：DNA连接酶;二、DNA连接酶——“分子缝合针”;思考：（05天津理综）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。 （1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后??形成的黏性末端。 （2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。 （3）在DNA连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？为什么？;③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？;DNA连接酶对基因工程诞生的意义? ——缝合DNA片段，可以将外源基因和载体DNA连接在一起 ;;最常用的质粒：大肠杆菌质粒;作为载体的必要条件;三、质粒;1、概念： 能够自主复制的双链环状DNA分子 ，在细菌中以独立于染色体外的方式存在，是一种特殊的遗传物质。;基因进入受体细胞的载体; 1972年,科学家首次用一种限制酶切割猿猴病毒SV40的DNA和λ噬菌体DNA分子,然后使用DNA连接酶进行连接,形成了重组的DNA分子.;同一种限制性核酸内切酶;同一种限制性核酸内切酶;;在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 ;不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ） A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA