863项目1项、重大科技.PDFVIP

活体分析化学实验室 2010 年度工作总结 主任：陈 义 副主任：毛兰群 主任助理：汪福意 本年度共承担各类国家项目 38 项：主持国家基金委杰出青年基金 1 项、重 大研究计划 4 项、重大国际合作 1 项、重点项目 1 项、仪器专项 1 项、面上基金 13 项，参加面上基金 1 项；主持“973”课题 1 项、“863”项目 1 项、重大科技 专项子课题 1 项，参加“973”课题 3 项；主持中科院方向性项目 1 项、课题 1 项、实施中科院“百人计划”1 项、“技术百人”1 项，参加中科院仪器项目 1 项；其他项目 5 项。 一、主要研究工作进展 1. 仪器研制 构建了一套无分子泵的离子阱微米尺度质谱新系统，在普通真空条件下，准 确测定了美国标准局 3 微米聚苯乙烯球标样的质量（8.81×1012 Da）；构建了小 型便携式质谱系统，获得了氨基酸和罗丹明的校准质谱；使用微扰方法，从理论 上论证了非线性囚禁场对离子阱质谱的特性影响。 完成了科技部支撑计划支持的 SPRi 商品化样机的研制工作，通过了结题验 收。所研制的 SPRi 仪器具有宽温控、可变焦、高分辨、多功能的新特点，其性 能全面超过现有商品仪器的水平。 2．生物识别与选择分析 （1）信号转导与抗癌药物 ① 结合计算机辅助设计技术，尝试不同的设计策略，合成了 14 种含有潜 在金属配位位点的蛋白酪氨酸激酶抑制剂及 7 种以其为配体的多靶点金属钌配 合物。ELISA 和 Docking 分析结果表明，合成的喹唑啉类化合物和钌配合物都很 好地保持了对表皮生长因子受体（EGFR）的特异性抑制活性，金属中心的引入使 原有机小分子抑制剂的水溶性得到明显改善。 ② 发展、建立了基于质谱分析的药物相互作用组学研究方法，比较研究了 有机金属钌抗肿瘤化合物和顺铂与转铁蛋白（Trf）、血红蛋白（Hb）和金属硫蛋 白（MT）等的相互作用和作用位点。研究发现，有机金属钌化合物都能与 Trf 表面的组氨酸、蛋氨酸残基配位，但钌化合物的结合不会导致Trf 变性型的构象 变化，因而 Trf 受体对 Trf-Ru 复合物的特异性识别，将有助于钌化合物的胞吞 和靶向传输；钌化合物与 Hb 的结合受化合物中有机配体的影响较为明显，只有 对甲基异丙基苯化合物能与?链的 His45（或 His50）结合；无论是在中性还是 酸性条件下，顺铂都能取代锌离子与金属硫蛋白（MTs）上的 Cys 残基结合，而 钌化合物与 MT 几乎没有反应，钌抗肿瘤药物对 MT 的惰性可能是其具有较低毒副 作用，以及与顺铂没有交叉抗药性的原因之一。 6 ③ 有机金属钌化合物[(? -p-cymene)Ru(acac)Cl]PF6 能有效抑制蛋白酪 氨酸磷酸酶 PTP1B 的催化活性（IC50：2.5?M）。除与表面的 His195、His296、 Met133、Met256 结合外，化合物2和5还能与PTP1B 表面的 Cys32 和 Cys121 以 及位于“口袋”内的 Cys215 和 Cys231 结合，并诱导巯基氧化生成亚磺酰或亚磺 酸。其中，Cys215 正是 PTP1B 的催化位点，这一发现表明有机金属钌化合物有 可能通过与 PTP1B 的共价结合，抑制 PTP1B 的催化活性及其对胰岛素介导的信号 转导过程的负调节作用，有望成为 II 型糖尿病治疗的先导化合物。 ④ 应用 LC-MS 分析，从动力学和热力学两个方面系统地研究了有机金属钌 抗肿瘤化合物与单、双链DNA 的相互作用。首次发现DNA 链中的