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天然产物化学综述：生物类黄酮的提取方法 PAGE  PAGE - 6 - 共 NUMPAGES 6页 生物类黄酮的提取方法综述 Gongsunxia 前 言??本文主要介绍了生物类黄酮的提取的传统、现阶段的常用和新兴方法，并对生物类黄酮的提取方法存在的问题和研究的方向做了阐述。 生物类黄酮 (bioflavonoids)又称黄酮类化合物，亦称维生素P，常与维生素C伴存，在自然界分布广泛，属植物次级代谢产物，是一组存在于蔬菜、水果、花和谷物中的天然色素，因多呈黄色而称生物类黄酮。生物类黄酮具有多种生物活性，配合维生素C在临床上应用已久，近年来随着研究方法和分离提纯技术的不断提高， 使生物类黄酮的研究进入了一个新的阶段。发现了许多新的种类和生理作用，特别是抗自由基及抗癌、防癌的作用，掀起了生物类黄酮的研究、开发利用热潮，其在医药、食品领域的应用具有广阔的前景。 1．1生物类黄酮的提取的传统和常用方法 生物类黄酮因其结构和来源的不同，溶解特性差异也很大，因此应据其极性和水溶性的大小选择合适的溶剂进行提取。目前，对苷类和极性较大的苷元，常用某些极性较大的混合溶剂(如甲醇-水(1∶1))、水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯进行提取，而对大多数苷元则采用乙醚、氯仿、乙酸乙酯等极性较小的溶剂进行提取。 生物类黄酮的提取和分离提纯传统方法主要分为水提法、碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法等。 1．1．1水提法 水提法仅限于提取黄酮苷类物质，在提取过程中要考虑加水量、浸泡时间、煎煮时间及煎煮次数等因素。例如:在银杏叶中提取黄酮类化合物，先取晾干的银杏叶，加水浸泡24ｈ、大火煮沸30min，文火闷蒸30min，待稍冷倾出上层黄绿液，蒸发、萃取、过滤即得。此工艺成本低、安全，适合工业化大生产，但是用水提取时，提取液中杂质较多(如无机盐、蛋白质、糖等)，给进一步分离带来许多麻烦。现在，已经很少单一使用本法。 1．1．2碱性水或碱性稀醇提取法 黄酮类物质大多具有酚羟基，因此可以用碱性水或碱性稀醇浸出，经酸化后得出黄酮类物质。主要用的碱性溶液是稀氢氧化钠和石灰水(氢氧化钙水溶液)。氢氧化钠水溶液的浸出能力高，但杂质较多不利于纯化。石灰水可以使一些鞣质或水溶性杂质沉淀生成钙盐沉淀，有利于浸液纯化，但是浸出效果不如氢氧化钠水溶液效果好，同时有些黄酮类化合物能与钙结合成不溶性物质，不被溶出。一般可以根据不同的原料使用不同的碱性溶液。例如从菊花中提取黄酮类物质时，用ｐＨ10的氢氧化钠溶液浸出效果较好;而从槐米中提取芦丁，则应用碱性较强的饱和石灰水作溶剂，这样则有利于芦丁成盐溶解。 1．1．3有机溶剂提取法 这是国内外使用最广泛的方法。有机溶剂主要用乙醇、甲醇、乙酸乙酯、乙醚等。本法主要用于提取脂溶性基团占优势的黄酮类物质，对设备要求简单，产品得率高，但成本较高，杂质含量也较高。常见的可以分为三种方法:冷浸法、渗漉法、回流法。冷浸法不需加热，但费时较长，效率低;渗漉法由于保持一定的浓度差，所以提取效率较高，浸液杂质较少，但费时较长，溶剂用量大，操作麻烦;回流法效率较冷浸法和渗漉法高，速度快，但含受热易破坏的原料不宜用此法。根据不同原料特点采用不同方法。例如:元宝枫叶粉中提取黄酮类物质用的是冷浸法，用70%乙醇提取，提取率和黄酮含量都很高，提取物较易浓缩和干燥;陈皮苷提取用乙醇渗漉法，使用50%或60%的乙醇，16倍提取物时提取效果最佳;从水飞蓟中提取水蓟宾，用乙酸乙酯做溶剂，用索氏提取法连续回流抽提9次然后在甲醇中经多次重结晶可得水蓟宾纯品。 在有机溶剂提取法中最常使用的溶剂是乙醇即醇提法。在提取过程中，乙醇的浓度对总黄酮的提取有较大影响，一般认为乙醇的浓度增高有利于总黄酮的提取。但并不绝对，还跟黄酮类物质的结构有关，高浓度乙醇适于提取黄酮苷元类，低浓度乙醇适于提取黄酮苷类。 2．1生物类黄酮的提取的现阶段新兴方法 生物类黄酮的提取和分离提纯现阶段新兴方法主要分为物理场辅助提取技术、酶解法、大孔树脂吸附法、超临界萃取法等。 2．1．1物理场辅助提取技术 超声场辅助提取技术 超声场辅助提取技术是利用超声波辐射压强产生的骚动效应、空化效应和热效应来加速物质的扩散溶解，有效地提高化合物提取的得率和含量。超声场对类黄酮提取的辅助作用主要来源于超声空化，超声的机械效应和热效应也会有一定贡献。超声空化产生的极大压力使得植物细胞壁及整个植物体在瞬间被破碎，并引起湍动效应、微扰效应、界面效应和聚能效应，其中湍动效应和机械效应使传质边界层减薄，增大传质速率;微扰效应强化了类黄酮的微孔扩散;界面效应增大了传质表面积;聚能效应和热效应加快了类黄酮分子扰动;从而整体上能提高提取过程的传质速率和效果，起到了辅助类黄酮提取的效果。 该技术用于类黄酮提取时具有提取时间短