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叶绿体中色素的提取及分离肖用华
欢迎各位领导莅临指导;“叶绿体中色素的提取和分离”实验改进;;;;四、对实验的几个地方进行的改进
1实验材料的改进:
用菠菜作为实验材料,易受季节性限制,此外,色素提取液呈黄绿色,色素带颜色浅,实验效果差。用韭菜,萝卜叶,蒿菜,天竺葵代替菠菜,所得到的实验效果很好,又可以克服菠菜因季节原因,难于取材。;2提取液的改进:
除丙酮外,也可用酒精(无水乙醇)替代,用量相同,结果大致相同;和酒精相比,丙酮有一定毒性,因而不妨换一下。;3过滤和制滤液的改进:
获取高浓度的色素提取液是该实验成功的一个关键环节。一般我们要求色素提取液呈墨绿色。为了得到墨绿色的色素提取液,我们可尝试取消漏斗基部放脱脂棉这一步,,而用3~4层纱布包裹充分研磨过的绿叶,用4层纱布过滤,,通过漏斗将汁液挤于试管中,将滤液收集到试管或小烧杯中备用。这样可以降低叶片含水量,从而提高叶绿体中色素的提取效率。实验证明,改进后较改进前实验效果明显。;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;4分离色素的改进:;另一种新的方法叫培养皿法 不用滤纸条,也不划滤液细线,而取直径为10cm的干燥圆形定性滤纸,用毛细吸管吸取色素滤液,在滤纸的中央点成圆形的色素斑,重复4~5次。然后取一枚缝衣针,穿一条细棉线,在棉线末端打个结,将针穿过滤纸上的色素斑中心,在距线结约4cm处剪断棉线。取直径l0cm的培养皿一套,向培养皿底中加入5ml层析液。把上述圆形滤纸扣在培养皿底上面,无线结的一面朝下,棉线则浸没在层析液中。再将培养皿盖盖在滤纸上。 ;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;采用该方法,可以看到色素随层析液由线结处向周围均匀扩散。因此得到的4条色素带呈同心环状,由内而外分别是黄绿色、蓝绿色、黄色和橙黄色,十分清晰。而且层析时,滤纸上的色素不会没及层析液中,点色素斑比划滤液细线容易得多,实验效果非常显著。结果证明:运用灯芯法分离色素,色素量大,分层清晰,四种色素分离出鲜明的四???色素环,效果显著;操作过程较易掌握,失误较少。此实验方法关键有两点需注意:一是几次滴液体要在同一点上,否则不能形成圆环;二是要掌握好滴层析液的量和时间,否则会影响效果,甚至失败。;谢谢
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