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第三章 细胞工程 ;细胞工程的概念;基本操作技术 ;细胞工程的研究范畴;第一节 植物细胞工程;细胞的全能性;植物细胞工程的范畴;植物组织培养的概念;9;植物组织培养的过程;植物组织培养的过程;植物组织培养的过程;植物组织培养的过程;植物组织培养的过程;植物细胞培养及次生代谢物的生产;红豆杉与紫杉醇;培养方式 悬浮培养 适于大量快速增殖细胞，但不利于次生代谢物的积累。 固定化培养 将细胞包埋在惰性支持物内部或贴附在表面。 固定化的细胞密集而缓慢的生长，利于分化。从而有利于代谢产物的合成。 细胞生长缓慢，但利于次生代谢物的积累。;5L气升式植物细胞培养罐;植物体细胞杂交;体细胞融合产生远缘杂交;植物体细胞杂交过程;植物体细胞杂交过程;植物体细胞杂交过程;植物体细胞杂交过程;25;植物细胞工程的实际应用;概念：应用组织培养技术，快速繁殖植物（快速繁殖技术） 优点：繁殖率高，可大批量生产 取材少 培养周期短 保持优良性状;作物脱毒;人工种子 1978年植物组织培养学家Muralshige提出的设想;人工种子;单倍体育种;第二节 动物细胞工程;1907年，Harrison 首先培养了蛙胚神经管区细胞，并观察到从中长出的轴突细胞（神经纤维），他的工作被认为是动物细胞培养开始的标志。;胚胎或幼龄动物的组织器官;2、传代培养的细胞都能一直传代下去吗？; 细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物，而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质，包括生物和化学物质。;细胞培养物污染的防治;常见真菌种类：烟曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、 白念珠菌、酵母菌等;支原体是介于细菌与病毒之间能独立生活的最小微生物，最小直径0.2μm，变形能力大，能通过滤器，光镜下难以看清它的形态结构。不易发现，对青霉素有抗药性。;细胞培养物污染的防治;动物细胞冷冻保存;1、细胞培养物中加入 Trypsin- EDTA进行消化。 2、吹打成单个细胞。 3、洗涤离心。 4、弃上清，加入预冷的冻存液，吹打均匀。 6、移入冻存管，置冰上或4 ℃ 冰箱30分钟。 7、 -80℃ 过夜。 8、液氮保存。;动物细胞融合;动物细胞融合; 1975年英国科学家Milstein和Kohler将产生抗体 的淋巴细胞同肿瘤细胞融合，成功建立了单克隆抗 体技术，而获得1984年诺贝尔医学和生理学奖。 每个B淋巴细胞仅专一地产生、分泌一种针对某 种抗原决定簇的特异性抗体，而肿瘤细胞可以无限 增殖，因此杂交瘤细胞可在体外培养或移植到体内 条件下分泌大量单克隆抗体。 单克隆抗体技术的最主要优点是可以用不纯的抗 原分子大量制备纯一的单克隆抗体。;设备准备 清洗 烘干 安装 消毒;Vero细胞和狂犬病毒的培养工艺;John Gurdon, ;细胞核移植实验的目的;Robert Briggs (A; 1911–1983) and Thomas J. King (B; 1921–2000). ;John Gurdon (1933-). ;细胞核移植与动物克隆-异种细胞核质互作;细胞核移植与动物克隆-异种细胞核质互作;Steen Willadsen; 克隆动物作为生物反应器，生 产医用蛋白 改良动物品种 可能的人体移植器官供体 开展对动物(人)生长、发育、 衰老和健康等机理的研究 拯救濒危动物;　理论问题 分化的体细胞克隆对遗传物质重编（细胞核内所有或大部分基因关闭，细胞重新恢复全能性的过程）的机理还不清楚； 克隆动物的成功率还很低 生出的部分个体表现出生理或免疫缺限 ;争议 动物福利者的反对！ 克隆动物的安全风险？ 坚决反对克隆人？ ;染色体的概念 组成成分 高级结构 ;染色体工程;染色体工程--动物细胞的染色体工程 ;染色体工程--动物细胞的染色体工程 ;直接转移法;应用前景 寻找新基因：如肿瘤抑制基因 哺乳动物人工染色体研究 如：人工染色体21ΔpqHAC 表观遗传学研究 ;染色体工程—植物细胞的染色体工程 ;;干细胞（stem cell）是具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体 这些细胞可通过 分裂 维持自身细胞的特性和大小，又可进一步 分化 为各种组织细胞，从而在组织修复等方面发挥积极作用。;制造特定的细胞，仅止于产生特定器官组织的细胞;干细胞工程;;干细胞工程—胚胎干细胞;干细胞工程;干细胞工程—癌干细胞;