细胞工程讲义.docVIP

PAGE  PAGE 44 细 胞 工 程 绪 论 第一节 生物工程 一.定义 生物工程，也称生物工艺学（biotechnology or bioprocess）,一般称为生物技术。目前，对于生物工程还没有一个统一的定义。一般意义上讲，生物工程（生物技术）是以生命科学为基础，利用生物体系和工程学原理生产生物制品和创造新物种的一门综合技术。换言之，就是利用生物有机体或其组成发展新工艺或制造新产品的一种科学技术。 一般认为生物工程技术主要包括基因工程，细胞工程，酶工程，微生物工程和生物化程。 二.发展历程 1. 第一代生物工程 人是生物界的一员，在人类的进化，发展的历史中，包括人对生物的认识和利用。为解决吃饭问题，人类从捕鱼，打猎发展到饲养牲畜，从生吃野果发展到种植，栽培庄稼，蔬菜等。 在我国殷商时期（???元前11至12世纪）就掌握了酿酒技术。两千多年前学会了制醋，造酱技术。在我国五千多年的文明史中，社会生产主要是畜牧业与种植业。人类缺乏对科学的了解，缺乏改造生物的有利手段。 1857年，巴斯德证实酒精发酵是由活酵母引起的。随后才逐渐了解到其他不同的发酵产物也由不同微生物的作用而形成的。至此，古老的生物技术才开始得到迅速的发展。 19世纪末到20世纪30年代这段时间不少工业发酵过程陆续出现，如：乳酸，酒精，面包酵母，丙酮，柠檬酸，淀粉酶等的生产。至此，以工业微生物过程生产为代表的真正意义上的生物工程才正式诞生了。 2．近代生物工程 从二十世纪中叶起，抗菌素等医药工业迅速发展，他们具有现代化工业技术水平，在保障人们身体健康中起了巨大作用，但这些生物工业所占的比重小，并没有引起人们对他的重视。 抗生素工业的兴起标志着工业微生物的生产进入了一个新的阶段。 3．现代生物工程 1953年，美国的沃森和克里克发现了DNA双螺旋结构，为DNA的重组奠定了基础。1979年，美国波依耳和科恩首次在实验室中实现了基因的转移，从而使人们有可能在实验室中组建按照人们的意志设计新的生命体。 20世纪70年代后，随着基因重组，细胞和组织培养，酶的固定化，动植物细胞的大规模培养，现代化生物反应器和计算机的应用以及产品分离 纯化等技术的迅速发展，生物工程进入了新的发展阶段现代生物工程阶段。 1996年7月，英国首次成功的采用体细胞克隆出绵羊“多莉”更是一项里程碑的现代生物工程成果。而这项成果就属于现代生物工程的一个主要领域细胞工程。 三．现代生物工程的特点与组成 在与生物工程相关的众多学科中，生物学 化学和工程学是关系最为密切的三门基础学科。关系如下： 一般都认为生物工程主要由：发酵工程 酶工程 细胞工程 基因工程四部分组成。后来，生物化学工程和蛋白质工程也被列入生物工程的范畴。因此，现在可以认为生物工程主要包括了以上六大领域的内容。关系如下： 第二节 细 胞 工 程 定义 细胞工程的发展是建立在细胞融合的基础上。19世纪30年代，Muller、 Schwann、 Virchow等相继在肺结核、天花、水痘等病理组织观察到了多核细胞（合胞体）的现象。但百余年来细胞融合现象没有引起人们的重视。 随着细胞生物学和分子生物学的发展，20世纪70年代末至80年代初出现了细胞工程 这一新型学科。 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或特种细胞产品的一门综合性科学技术。 细胞工程学的发展过程 1907年，细胞培养技术的建立及发展，为细胞融合的研究工作创立了实验条件。 1954年，Enders等人观察到麻疹病毒能使离体的宿主细胞产生多核体；1958年，冈田（Okada）发现紫外线灭活的仙台病毒可引起艾氏腹水瘤细胞彼此融合。1965年，Harris诱导不同的动物细胞彼此融合，并能存活下去。1964年，Lifflefield根据亲本细胞的酶缺陷型，利用HAT选择性培养基能使两种亲本细胞死亡而只留下异性融合细胞，并能不断增殖。在以后的十多年中细胞融合技术广泛地应用于遗传学 病毒学 免疫学 细胞学等多种学科的研究工作中。如，从事免疫学研究的Kohler、 Milstein (1975年)获得单克隆抗体，是免疫学上的一大革命。 植物细胞和微生物细胞的外面均有一层坚韧的细胞壁，而难于进行细胞融合，因而起步比动物细胞融合要迟十年左右 。到1970年，Cooking 找到合适的酶破坏植物细胞壁，形成原生质体，才使植物原生质体的融合迅速开展起来。1972年，Smith 进行了烟草种间融合