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第五章 凝集反应;第一节 凝集反应的特点
第二节 直接凝集反应;第一节 凝集反应的特点;反应阶段:
抗原抗体的特异性结合
出现肉眼可见的凝集现象(聚集交联)
反应特点:
IgM的作用比IgG大数百倍
IgG与抗原结合后,常不出现凝集反应,称不完全抗体
;颗粒性抗原在悬液中带负电荷,周围吸引一层与之牢固结合的正离子,外面又排列一层松散的负离子,构成一个双层电子云。在松散层内界和外界间的电位差形成Z电位。溶液中负离子强度越大,Z电位也越大,Z电位使颗粒间互相排斥。
当抗原与相应抗体结合时,抗体的交联作用克服了抗原颗粒表面的Z电位,而使颗粒相互靠拢,聚集在一起。
当抗体的分子太少或分子量小,不能克服相当厚度的离子云层时,则不能使颗粒聚集。在凝集反应中IgM的作用远大于IgG。
为促使凝集现象的出现,可采取以下措施:1、增加蛋白质和电解质,缩短颗粒间的距离;2、增加溶液的黏稠度;3、用胰酶和神经氨酸酶处理;4:以离心的方式克服颗粒间的排斥力。
;可见反应形成;第二节 直接凝集反应;(一)玻片凝集试验;方法评价:
定性试验
简便和快速
敏感度低
; 在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象。;;试管凝集试验;方法评价:
半定量试验
简便、快速
敏感度低
可有假阳性;第三节 间接凝集反应;载体种类:
RBC(醛化)
聚苯乙烯胶乳颗粒(羧化);正向间接凝集试验
反向间接凝集试验
间接凝集抑制试验
协同凝集试验;;;;与indirect agglutination 相似
SPA:SPA-IgG Fc;
SPA抗体致敏------测抗原;二、间接血凝试验
Hemagglutination test;;;;三、胶乳凝集试验;聚苯乙烯致敏颗粒;四、明胶凝集试验;五、间接凝集反应的应用;第四节 自身红细胞凝集试验间接凝集实验;自身红细胞凝集试验(autologous red cell agglutination assay)与一般间接血凝试验不同之处为反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜红细胞。主要试剂材料为抗人O型红细胞的单克隆抗体,这种抗体能与不论何种血型的红细胞结合,但不引起凝集反应。这种抗体与另一特异性抗体连接成的双功能抗体可用于检测标本中的抗原;如与特异性抗原连接,则可用于检测标本中的抗体。反应中的标本为受检者的全血。;自身红细胞凝集试验;抗球蛋白试验又称
Coombs试验; 测定患者红细胞上有无附着不完全抗体。在洗涤过的红细胞悬液加入含抗人球蛋白的试剂,混和后离心一分钟促进凝集。如果肉眼或显微镜下能见到红细胞凝集,即为阳性,说明红细胞表面有不完全抗体。
新生儿溶血、自体免疫溶血性贫血、输血反应、某些药物或疾病引起的免疫溶血性贫血。;(一)直接Coombs试验;(二)间接Coombs试验;(二)间接Coombs试验;临床应用:
在输血上的应用
血型抗原抗体的检查
对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断
对溶血性贫血的研究
对细菌或立克次体的不完全抗体检查
;1.凝集反应的特点是什么?
2.什么叫直接凝集反应,什么叫间接凝集反
应?它们之间有何异同?
3.叙述间接血凝试验的原理。
4.彩色胶乳凝集试验的特点是什么?
5.什么是不完全抗体?
6.什么是直接Coombs? 什么是间接Coombs,
它们之间有何区别?
7.叙述抗人球蛋白试验的类型及其原理?
8.叙述抗人球蛋白试验的临床应用
9.凝集反应的优缺点是什么?
10.凝集反应的发展趋势是什么?;小结
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