甲壳素脱乙酰酶产生菌的筛选及产酶条件.pdfVIP

第 ! 卷 第 # 期 武汉大学学报（理学版） 89:) ! 29) # $ $ %! 年 ’ 月 () *+,-. /.01)（2-3) 450) 67) ） ;+) %!，#’! = #’’ 文章编号：GF’’IG（%!）##’!# 甲壳素脱乙酰酶产生菌的筛选及产酶条件 ， 蔡$ 俊 % ，杜予民?，杨建红 ，邱雁临% （) 武汉大学 资源与环境科学学院，湖北 武汉 #IFE；%) 湖北工业大学 生物工程学院，湖北 武汉 #IG’） $ $ 摘$ 要：采用固体平板培养和液体发酵筛选产生甲壳素脱乙酰酶的真菌，并且研究了产酶条件) 结果显示在 #% 株真菌中有 %G 株有甲壳素脱乙酰酶活性，最终确定了构巢曲霉和蓝色犁头霉两株产酶活性较高的菌株，它们产 生的酶活性分别是 I#I /· @J K 和 %’E /· @J K ) 不同的菌株的产酶培养基中的碳源均为含乙酰基的碳源，最适氮源 分别为酵母粉和蛋白胨，产酶能力都受 L.% M 和 N9% M 促进，受 N+% M 、OD% M 、ODI M 的抑制；构巢曲霉的最适温度、最适 PQ 分别为 %E R ，F) = F) !，蓝色犁头霉的最适温度、最适 PQ 分别为 I R ，G) ! = F) ，最适发酵时间均为 EG ,) 关$ 键$ 词：甲壳素脱乙酰酶；构巢曲霉；蓝色犁头霉；产酶条件 中图分类号：S EI!$ $ $ 文献标识码：; 学生物工程学院) ! 引$ 言 ) ) %$ 试剂 颜色反应试剂（ ）， 甲基 苯并噻唑腙（ $ $ 甲壳素，又称几丁质（ 5,030.）是由 2乙酰氨基 V2 I LW ）， 乙酰氨基壳六糖，购自 公司；可溶性 T葡萄糖单体通过 !) #糖苷键连接而成的直链高 XQ 2 40@- 分子化合物，当分子中的乙酰基部分或全部脱除后， 壳聚糖（脱乙酰度 #’Y ，分子量 %) ’ Z ! ）为自制； 氨基葡萄糖盐酸盐由浙江澳兴生物科技有限公司提 则形成壳聚糖（ 5,039U-.）) 甲壳素脱乙酰酶（ 5,030. 供，纯度为 ，其他化学试剂均为分析纯 7D-5D3A:-UD，6) N) I) !) ) #）则可催化水解脱掉甲 EE) !Y ) 培养基和培养方法 壳素上的乙酰基) 将可替代现有的浓碱法生产高质 #) $ 量的壳聚糖，这不仅可以解决环境污染问题，而且可 ) %) $ 固体斜面培养基 以生产出用化学法较难得到的高质量的壳聚糖产 VT; 培养基) 初筛固体