一株产木聚糖酶菌株的筛选鉴定及产酶条件初步优化.pdfVIP

　 第４５ 卷第１ 期 工业微生物 　 Ｖｏｌ． ４５ Ｎｏ． １　 　 ２０１５ 年２ 月 Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ Ｆｅｂ． ２０１５ ｄｏｉ：１０． ３９６９ ／ ｊ． ｉｓｓｎ． １００１ － ６６７８． ２０１５． ０１． ００８ 一株产木聚糖酶菌株的筛选鉴定及产酶条件初步优化 罗　 玲，　 蔡　 俊 ，　 王常高，　 杜　 馨，　 林建国 湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室和工业发酵湖北省协同创新中心，湖北武汉４３００６８ 摘　 要：本研究从造纸厂的污泥及污水筛选获得了一株产木聚糖酶能力较强的菌株，经鉴定该菌 株为异硫链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｌｔｈｉｏｔｉｃｕｓ），专利保藏号为ＣＣＴＣＣ Ｍ ２０１４１１０。通过单因素试验初步 优化了碳源、氮源、温度、初始ｐＨ、发酵周期、摇床转速、接种量及装液量。试验结果显示该菌株最 佳产酶条件为：以为玉米芯为碳源，用量３０ ｇ ／ Ｌ；以大豆粉与硝酸钾复合物为氮源，用量分别为２０ ｇ ／ Ｌ 和１０ ｇ ／ Ｌ；发酵周期１２０ ｈ，发酵温度４０ ℃ ，接种量６％ ，初始ｐＨ ５． ０，装液量５０ ｍＬ ／ ２５０ ｍＬ 三 角瓶，摇床转速为１６０ ｒ ／ ｍｉｎ。 关键词：木聚糖酶；筛选；异硫链霉菌；产酶条件 　 　 木聚糖（Ｘｙｌａｎ）是半纤维素的主要组成成分，也 本研究旨在筛选一株产木聚糖酶能力强，酶组 是植物细胞壁的重要组成成分，是自然界中仅次于 分单一，纤维素酶活力低的菌株，并优化发酵工艺条 纤维素的多糖，在植物的总含量大约占１ ／ ３ 左 件，提高发酵酶活。 右［１３］。木聚糖酶是指能够降解木聚糖成低聚木糖 和木糖的一组酶系的统称，主要包括β１，４外切木 １　 材料与方法 ［４］ 聚糖酶，β１，４内切木聚糖酶和β木糖苷酶。木 聚糖酶在食品、纺织、饲料、医药、能源和造纸工业等 １． １　 土样 　 　 造纸厂采集的污泥和污水。 方面都具有广阔的用途［５］。由于部分链霉菌菌株 ???产生较高活性的木聚糖酶且酶比较单一，纤维素 １． ２　 培养基 酶活较低，有较高的工业应用价值，因此近年来被广 　 　 富集培养基（ｇ ／ Ｌ）：自制玉米芯木聚糖１０、蛋白 ［６］ １０ ＮａＣｌ ５ Ｋ ＨＰＯ １． ５ ＭｇＳＯ ７Ｈ Ｏ １． ０ 泛关注。ＲｕｉｚＡｒｒｉｂａ 等用燕麦木聚糖诱导霍耳斯 胨、 、 ２ ４ 、 ４ · ２ 。 特德氏链霉菌（Ｓ． ｈａｌｓｔｅｄｉｉ）Ｍ８ 产木聚糖酶，其酶活 选择性分离培养基（ｇ ／ Ｌ）：自制玉米芯木聚糖 ［７］ ８ ＫＮＯ １． ０ ＮａＣｌ ０． ５ ＭｇＳＯ ７Ｈ Ｏ ０． ５ 力为１４４ Ｕ ／ ｍＬ ；李家群等用稻草粉在最佳条件下 、 ３ 、 、 ４ · ２ 、 发酵培养链霉菌ＬＨ３，木聚糖酶活力最高为１２０． ３ Ｋ２ ＨＰＯ４１． ０、琼脂２０。 ［８］ Ｕ ／ ｍＬ ；Ｃｏｍａｎ Ｇ 等利用Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ． Ｐ１２１３７ 种子培养基（ｇ ／ Ｌ）：可溶性淀粉２０、ＫＮＯ３ １． ０、 以小麦麸皮作碳源产木聚糖酶，其酶活为２７． ７７ Ｋ２ ＨＰＯ４ ０． ５、ＭｇＳＯ４ ·７Ｈ２ Ｏ ０． ５、ＮａＣｌ ０． ５、ＦｅＳＯ４ · ［９］ ＵＡ ／ ｍＬ 。我国是农业大国，但农业废弃物没有得 ７Ｈ２ Ｏ ０． ０１。 到较好的利用，造成巨大的资源浪费。如玉米芯中 复筛发酵培养基（ｇ ／ Ｌ）：玉米芯粉２０、酵母粉 木聚糖含量高达３５％ ，可利用木聚糖酶将其转化为 １０ 、Ｋ２ ＨＰＯ４ ０． ５、Ｎａ２ ＨＰＯ４ ０． ５、ＭｇＳＯ４ ·７Ｈ２ Ｏ １． ０。 低聚木糖等产品，不仅能提高玉米芯等农业废弃物 斜面保藏培养基（ｇ ／ Ｌ）：可溶性淀粉２０、ＫＮＯ３ 的附加价值，同时也能减少环境污染，有巨大的应用 １． ０、Ｋ２ ＨＰＯ４ ０． ５、ＭｇＳＯ４ ·７Ｈ２ Ｏ ０． ５、ＮａＣｌ ０． ５、Ｆｅ ［１０］ 潜力 。 ＳＯ４ ·７Ｈ２ Ｏ ０． ０１，琼脂粉２０。 作者简介：罗玲（１９９０ ～ ），女，在读硕士。Ｅａｉｌ：ｊｋｒｊｌｌ＠ ｌｉｖｅ． ｃｏｍ。 通讯作者：蔡俊，男，教授。Ｅｍａｉｌ：ｃａｉｊｕｎ＠ ｍａｉｌ． ｈｂｕｔ． ｅｄｕ． ｃｎ。 —４３ — 　 第１ 期