第04章核酸化学2015.pptVIP

第 四 章核酸化学;; 概 述; 一、核酸的发现和研究工作进展 ; 一、核酸的发现和研究工作进展 ;坐落在北京中关村高科技园区的DNA雕塑，以它简洁而独特的双螺旋造型吸引着过往行人。DNA已经目前被作为高科技的标志。;二、核酸的分类、分布及功能 ;;第一节 核酸的分子组成 The Molecular Component of Nucleic Acid;;二、核酸的基本组成单位——核苷酸;*;;;;*;;*;;三、核苷酸的功能;第二节 核酸的分子结构 The Molecular structure of Nucleic Acid;核 酸(nucleic acid) ;核酸的分子结构;定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。;多核苷酸链;A ;;DNA的二级结构-双螺旋结构 DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义 DNA双螺旋结构模型要点 DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装 DNA的超螺旋结构 原核生物DNA的高级结构 DNA在真核生物细胞核内的组装 DNA的功能;（一） DNA的二级结构——双螺旋结构;;;罗莎琳德·富兰克林 （1920-1958） 迟到的诺贝尔奖（2011年，化学奖） 伦敦国王学院：罗莎琳—威尔金斯馆 英国皇家学会：“富兰克林奖章 ;2、 DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953）;3、;（二）DNA的高级结构是超螺旋结构 ;意义 DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。 ;1、原核生物DNA的环状超螺旋结构;;真核生物染色（质）体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是 核小体(nucleosome)。;; 核小体的组成;真核生物： DNA分子多层次压缩包装;;DNA是遗传信息的物质基础;三、RNA的种类与分子结构;RNA分子通常以单链形式存在，单链RNA可以通过链内互补构成局部的二级结构或三级结构。如果RNA互补双链部分存在未配对的碱基，就会形成鼓泡、膨胀环和发夹结构。??;真核细胞中RNA的种类、分布、功能;;;2、 成熟mRNA的结构特点;;* tRNA的结构特点 含 10~20% 稀有碱基，如 DHU、 ?、mG等 3′末端为 — CCA-OH，是氨基酸的结合部位 5′末端大多数为G; tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 D （DHU）臂和D环 反密码子臂和环 TΨC臂和TΨC环 额外环 ;;;2、tRNA的倒L形三级结构;;;* 18S rRNA的结构;;;snmRNAs的种类 核内小RNA 核仁小RNA 胞质小RNA 催化性小RNA 小片段干涉 RNA ;siRNA（small interfering RNA） ; 近几年来RNAi研究取得了突破性进展，被《Science》杂志评为2001年的十大科学进展之一，并名列2002年十大科学进展之首。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。 ;核 酸 的 理 化 性 质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid;一、核酸分子具有强烈的紫外吸收特征：;;二、DNA的变性与复性;方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、 酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。;;;例：变性引起紫外吸收值的改变;（二）DNA的复性(renaturation) ;;（三）热变性与溶解曲线; Tm：变性是在一个相当窄的温度范围内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。;;变性后的DNA在复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件（温度及离子强度）下，就可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。;这种杂???双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。;;核酸分子杂交的应用 研究DNA分子中某一种基因的位置 鉴定两种核酸分子间的序列相似性（利用探针已知序列进行特异性的靶序列检测 ） 检测某些专一序列在待检样品中存在与否 是基因芯片技术的基础