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微生物标本采集标
微生物标本采集标准化的意义及落实;微生物标本采集标准化的意义;微生物实验室设立的目的;微生物实验室的功能;;全部检验流程中各分析阶段实验室检验错误; 分析前因素导致的误差占总误差的 46-68.2%.* 分析后期产生的误差占总误差的 18.5-47%. * 分析中产生的误差占总误差的 15% (Errors in clinical laboratories or errors in laboratory medicine? Plebani M. Clin Chem Lab Med. 2006; 44(6):750-9);;良好的微生物检查标本;如何规范微生物标本采集?;标本采集的原则;标本采集部位;人体各部位的微生态系;细菌的分布;注意生物安全;微生物检查标本的采集与运送原则;微生物检查标本的采集与运送原则;血培养标本的采集原则;菌血症和真菌血症----直接威胁生命的感染性疾病;Adapted from Phillips et al., 1990;血培养标本采集的关键点;无菌皮肤的准备;什么时候采集血培养的最佳?;0;什么时候采集血培养的最佳?;应该采集多少份血培养?;每次采集血培养的间隔时间?;应采集多少血液?;血培养建议;儿童血培养;痰培养标本的采集规范;痰是最方便和无创伤性病原学诊断标本,但咳痰易遭口咽部细菌污染。因此痰标本质量好坏、送检及时与否、实验室质控如何,直接影响细菌的分离率和结果解释,必须加以规范。;(1)采集:须在抗生素治疗前采集标本。嘱病人先行嗽口,并指导或辅助病人深咳嗽,留取脓性痰送检。无痰病人检查分支杆菌和卡氏肺孢子虫可用高渗盐水雾化吸人导痰。真菌和分支杆菌检查应收集3次清晨痰标本;对于通常细菌,要先将标本进行细胞学筛选,1次即可。
(2)送检:尽快送检,不得超过2h。延迟送检或待处理标本应置于4t保存(疑为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌感染不在此列),保存标本应在24h内处理。
(3)实验室处理:挑取脓性部分涂片作革兰染色,镜检筛选合格标本(鳞状上皮细胞10个/低倍视野、多核白细胞25个/低倍视野,或二者比例1:2.5)。以合格标本接种于血琼脂平板和巧克力平板两种培养基,必要时加用选择性培养基或其他培养基。用标准4区划线法接种作半定量培养。涂片油镜检查见到典型形态肺炎链球菌或流感嗜血杆菌有诊断价值。;2.检测结果(通常细菌、非典型病原体)诊断意义的判断:
(1)确定:①血或胸液培养到病原菌;②经纤维支气管镜或人工气道吸引的标本培养到病原菌浓度≥ ++、支气管肺泡灌洗液(BALF)标本≥+—++、防污染毛刷样本(PSB)或防污染BAL标本≥ +;③呼吸道标本培养到肺炎支原体或血清抗体滴度呈4倍增高;④.血清肺炎衣原体抗体滴度呈4倍或4倍以上增高;⑤血清嗜肺军团菌直接荧光抗体阳性且抗体滴度4倍升高。;(2)有意义:①合格痰标本培养优势菌中度以上生长≥+++;②合格痰标本少量生长,但与涂片镜检结果一致(肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌);③人院3天内多次培养到相同细菌;④血清肺炎衣原体抗体滴度增高≥ 1:32;⑤血清嗜肺军团菌试管凝集试验抗体滴度一次升高达1:320或间接荧光试验)1:256或4倍增高达1:128。;(3)无意义:①痰培养有上呼吸道正常菌群的细菌(如草绿色链球菌、表皮葡萄球菌、非致病奈瑟菌、类白喉杆菌等);②痰培养为多种病原菌少量(+++)生长;③不符合(1)、(2)中的任何一项。
;二、HAP的病原学诊断
与CAP的要求与步骤相同。必须
特别强调:①准确的病原学诊断对HAP处理的重要性甚过CAP。②HAP患者除呼吸道标本外常规作血培养2次。
③呼吸道分泌物细菌培养尤需重视半定量培养。HAP特别是机械通气患者的痰标本(包括下呼吸道标本)病原学检查存在的问题不是假阴性,而是假阳性。培养结果意义的判断需参考细菌浓度。此外,呼吸道分泌物分离到的表皮葡萄球菌、除奴卡菌外的其他革兰阳性细菌、除流感嗜血杆菌外的嗜血杆菌属细菌、微球菌、肠球菌、念珠菌属和厌氧菌临床意义不明确。;④在免疫损害宿主应重视特殊病原体(真菌、卡氏肺孢子虫、分支杆菌、病毒)的检查。
⑤为减少上呼吸道菌群污染,在选择性病例应采用侵袭性下呼吸道防污染采样技术。
⑥在ICU内HAP患者应进行连续性病原学和耐药性监测,指导临床治疗。
⑦不动杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙雷菌、肠杆菌属细菌、军团杆菌、真菌、流感病毒、呼吸道合胞病毒和结核杆菌可以引起HAP的暴发性发病,尤应注意监测、追溯感染源、制定有效控制措施。
;分枝杆菌培养标本;重复诱导性咳痰诊断肺结核涂片与培养结果比较;尿培养标本的采集规范 ;尿路感染概述;诊断尿路感染最常用的
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