- 1、本文档共52页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
高中生物同步课件:1.2-基因工程的基本操作程序(新人教版选修3)
1.2 基因工程的基本操作程序;学习导航
1.掌握目的基因获取的常见方法。 [难点]
2.学会基因表达载体构建的方法和要求。 [重点]
3.理解目的基因导入受体细胞的具体过程。
4.掌握目的基因检测与鉴定的具体操作。 [要点];;基因文库包括两种:________文库,即包含一种生物所有基因的文库;__________文库,即只包含一种生物的一部分基因的文库,如cDNA文库。
2.利用PCR技术扩增目的基因
(1)PCR的含义:是一项在生物______复制特定DNA片段的核酸合成技术。
(2)目的:短时间内大量扩增目的基因。
(3)原理:________________。;(4)过程:
第一步:加热至90~95℃,_______________ ;
第二步:冷却至_________℃,引物与两条单链DNA相应互补序列结合;
第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶(Taq酶)从引物起始进行互补链的合成。
如此重复循环多次。
(5)特点:指数形式扩增。;想一想
1.PCR过程中,需要解旋酶吗?所需要的DNA聚合酶应具有什么特点?
【提示】 PCR过程中,DNA双链解开是在高温下完成的,不需要解旋酶;由于PCR过程温度较高,所以需要能耐高温的DNA聚合酶。;3.用化学方法人工合成
如果基因比较___,核苷酸序列又已知,也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
二、基因表达载体的构建
基因表达载体的组成:必须有启动子、____________、终止子以及标记基因等。;三、将目的基因导入受体细胞
1..转化
___________进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。
2.常用的导入方法
(1)将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是________转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法。;(2)将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是__________技术。此方法的受体细胞多是_________。
(3)将目的基因导入微生物细胞的方法:
①用_______处理细胞,使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生物状态,这种细胞称为________细胞。
②将重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合,在一定温度下完成转化过程。;想一想
2.从细胞器的功能上分析,若通过基因工程生产人的糖蛋白,可以用大肠杆菌吗?
【提示】 不可以,糖蛋白上的糖链是在内质网和高尔基体上加工完成的,而内质???和高尔基体存在于真核细胞中,大肠杆菌是原核生物,细胞中不含有这两种细胞器。;四、目的基因的检测与鉴定
1..首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了_________,方法是采用______________技术。
2.其次还要检测目的基因是否转录出了________,方法是采用__________技术。;3.最后检测目的基因是否翻译成________,从分子水平检测的方法是采用______________技术。
4.有时还需进行___________水平的鉴定。如需要做抗虫或抗病的接种实验等。;;比较项目;2.人工合成目的基因常用方法
人工合成目的基因的方法主要有两种。
(1)反转录法,主要用于相对分子质量较大而又不知其序列的基因,它是以目的基因的mRNA为模板,借助反转录酶合成碱基互补的单链DNA,然后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA,其过程如下:;(2)化学合成法,即依照某一蛋白质的氨基酸序列,通过密码子推算出其基因序列,然后直接合成目的基因,其过程如下:; (2012·青岛市高二期末)1970年,科学家证实了RNA病毒能依赖RNA合成DNA的过程,并发现了催化此过程的酶。下面为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解回答下列问题:;(1)催化①过程的酶是________;核酸酶H的作用是________。
(2)③过程也称为DNA的变性,此过程在温度高达90~95 ℃时才能完成,说明DNA分子具有________性。;(3)由图中信息分析可知,催化②⑤过程的酶都是______________,两者在作用特性上的区别是____________________________________
____________________________________。
(4)如果RNA单链中有碱基100个,其中A占25%,U占15%,则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶________个。;【解析】 根据图示可以看出,该过程是RNA在逆转录酶的催化作用下形成cDNA(负链DNA),构成RNA—DNA中间体。中间体中的RNA再经过RNA酶H水解,而以剩下的负链DNA复制成双链DNA。①过程是由RNA合成DNA的过程,需要逆转录酶进行催化。②过程是以单链DNA复制获得双链
您可能关注的文档
- 高中文言词语与句式.ppt
- 高中物理 必修二 第三章 第4节 斜抛运动 课件 (共25张PPT).ppt
- 高中数学第三章3.3.2(二)简单的线性规划问题(二)课件新人教A版必修.ppt
- 高中数学苏教版选修2-2课件:第三章 数系的扩充与复数的引入 3.2.1.ppt
- 高中物理(人教版选修3-3)第七章同步教学课件7.1 物体是由大量分子组成的 (共19张PPT).pptx
- 高中数学第二章2.2等差数列(一)学案课件苏教版必修.ppt
- 高中物理,必修2,精品课件动能和动能定理.ppt
- 高中物理-功率.ppt
- 高中数学第三章综合复习课件新人教A版必修.ppt
- 高中物理《向心力》ppt.ppt
- 2.1神经调节的结构基础 课件 人教版高中生物学选择性必修1.pptx
- 2.2.1算术平方根 课件 北师大版数学八年级上册.pptx
- 2.3.1细胞通过分裂而增殖 课件(内嵌视频3个)初中生物学北师大版(2024)七年级上册.pptx
- 2.3.2细胞分化形成组织 课件 初中生物学北师大版(2024)七年级上册.pptx
- 4.3.1 角与角的大小比较 课件 2025-2026学年湘教版数学七年级上册.pptx
- 2.3.3生物体的器官、系统 课件 初中生物学北师大版(2024)七年级上册.pptx
- 聚异氰酸酯行业商业计划书.docx
- 2.4节神经系统的分级调节 课件 人教版高中生物学选择性必修1.pptx
- 【公开课】探索勾股定理第1课时(课件)数学北师大版2024八年级上册.pptx
- 综合实践 一天的时间(课件)2025-2026学年度苏教版数学三年级上册.pptx
文档评论(0)