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第一章：组织学绪论 重点 组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念 组织学学习方法要点 石蜡切片术和超薄切片术的基本原理 HE染色法 组织学 研究机体微细结构及其相关功能的科学 研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子 组织（tissue） 构成：细胞群和细胞外基质 细胞：机体结构和功能的基本单位，成人约有1015 个、200 余种 细胞外基质：由细胞分泌形成 类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织 组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官；若干功能相关的器官构成系统 发展历史 ·光学显微镜（光镜light microscope，LM） 光镜技术 1.石蜡切片术（paraffin sectioning）：取材（组织块多不超过1.0㎝）、固定（蛋白质凝固剂，常用甲醛）、脱水（酒精，后用二甲苯置换）、包埋（放入融化的石蜡中）、切片（使用切片机5 ～ 10 μm 厚）、染色（脱蜡后进行染色，以提高组织成分的反差）、封片(脱水处理后滴加树胶，用盖玻片密封保存)较大组织块——火棉胶；蛋白质——液氮冷冻后于恒冷箱切片机切片（冰冻切片）； 2.苏木精- 伊红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色 3.嗜酸性（acidophilia);嗜碱性(basophilia)：易于被酸性或碱性染料着色的性质 ·细胞学说（施万，施莱登）内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生 ·电子显微镜(电镜electron microscope, EM) 电子束代替可加光，电磁透镜代替光学透镜，荧光屏使肉眼看不到的电子束成像 超薄切片术（50－80nm） 超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构 电镜技术1.投射显微镜(TEM）：超薄切片50~80nm；于机体死亡数分钟内取材，组织块（1㎜以内）用戊二醛与锇酸两次固定，脱水后树脂包埋，用超薄切片机切片，在经醋酸铀和柠檬酸铅染色，电镜照片呈黑色或深灰色（高电子密度）浅灰色（低电子密度）——密度大、吸附重金属多的结构，电子被散射的多，呈暗像即黑或深灰色。 2.扫描电镜术(SEM):无需制备切片，组织块（约0.3㎝）用戊二醛与锇酸固定后经脱水、干燥，再于其表面喷镀薄膜碳与金属膜，有立体感。 ·当代组织学 组织化学术在组织切片定性、定位地显示某种物质的存在与否以及分布状态，还可近一步用显微光分光光度计或图像分析仪测定切片中该物质反应强度，获得定量的信息。应用于游离细胞时称细胞化学术。 1.一般组织化学术：原理是在切片中加上某种试剂与待检物质发生化学反应，最终产物是有色沉淀物或重金属沉淀。糖类——过碘酸希夫反应（PAS反应）显示多糖和糖蛋白的糖链。糖被强氧化剂过碘酸氧化后形成多醛，再于无色品红硫酸复合物即希夫试剂结合形成紫红色反应产物。 2.免疫组织化学术：原理是根据抗原与抗体特异性结合。检测组织中肽和蛋白质，肽和蛋白质均具有抗原性。 3.原位杂交术：即核酸分子杂交组织化学术。原理是用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞内待测的核酸按碱基互补配对的原则进行特异性原位结合，即杂交，再通过对检测物的显示和检测而获知待测核酸的有无及相对量。常用标记物有S、P、H等（经放射显影术后观察）与地高辛（一种小分子药物，经免疫组织化学处理后处理） 放射自显影术通过活细胞对放射性物质特异性摄入以显示该细胞的功能状态或该物质在组织和细胞内的代谢过程.H标记的胸腺嘧啶核素——研究细胞的DNA合成及其增殖状态；I——碘在甲状腺滤泡的碘化部位。由于污染问题现渐被安全的体内标记和示踪法代替。 图像分析术又称形态计量术。可获得立体的组织和细胞内各种有形成分的数量、体积、表面积等参数，从量的角度显示了结构与功能的关系。也可测量组织化学染色切片，根据染色深浅而提供该物质含量的相对数值。该技术需要使用图像分析仪。另外，根据连续的组织切片应用计算机进行三维重建，以获得可供研究的微细结构的立体模型——体视学。 细胞培养术和组织工程 1.细胞培养术把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。组织块——组织培养；器官的较大部分或全部——器官培养术；体外培养以及用体外培养物进行的实验常简称为in vitro(在体外)。培养条件：适宜的营养、生长因子、pH值、渗透压、O和CO浓度、温度等，严防微生物污染。培养液用含有多种营养成分的人工合成营养基配制，内加5%~10%的胎牛血清（含多种生长因子）。 培养的细胞除少数种类（如淋巴细胞）悬浮于培养液中，一般都贴在培养瓶壁上生长（贴壁生长）。原代培养——首次从体内取出的细胞进行培养；