李善刚《医学实验动物学》动物实验基本技术与模拟肿瘤接种.pdfVIP

n 1.掌握大小鼠常用给药方法和采血技术 n 2.掌握大小鼠的麻醉方法和解剖步骤 n 3.熟悉大小鼠的解剖 结构 n 将实验小鼠徒手固定 n 灌胃针从嘴角处插入口腔内，紧贴 咽后壁插入食道（1ml注射器，深度 大约为3cm） n 推动针管给药（生理盐水） n 注意不要插入气管，不要抓的太紧 以致小鼠窒息死亡 尾静脉 n 固定器固定小鼠 n 消毒尾部，扩张血管，左右两侧的静脉 n 将尾巴成一个适宜注射的角度，1ml注射 器平行向心方向刺入静脉血管 n 干棉球压迫止血 n 注意排除气泡 n 注射点由尾部远端 n 右下腹腔麻醉（麻醉药为3.5%水合氯醛，剂 量按0.1ml/10g) n 待其麻醉后，仰卧位固定在解剖板上 n 胸骨左侧，腋窝平行线下2-3肋骨间，小鼠心 搏动最强处斜行刺入（1ml注射器） n 缓慢抽动针管采血 n ??血量多时采用（同样适用于大鼠） 大鼠心脏采血 解剖观察 1.了解裸小鼠和KM小鼠的胸腔结构 了解正常的胸腺结构与不增殖胸腺基的形 态 2.掌握正确的胸腺摘除方式 3.掌握组织块（肿瘤）皮下移植的基本技 术 ?哺乳动物的胸腺是T淋巴细胞分化成熟的场所， 而T淋巴细胞是参与宿主对异体的组织或细胞排斥 的主要成分，裸鼠胸腺的原基从第三咽囊起不能 发育，因此，裸鼠囊状很小的胸腺残基保持终身。 ?胸腺的不增殖导致成熟的T淋巴细胞数大量减少， 其结果是裸鼠机体不能排斥同种异体和异种间的 组织器官移植。 ?人类的肿瘤能在裸鼠的体内生长，使裸鼠作为一 种疾病模型的载体，广泛地运用于研究人类移植 性肿瘤生长和转移。 ?组织的相容性 ?宿主对移植物的血供 ?供体组织或细胞的活性 ?其他因素 n 肾脏组织 ——是哺乳动物中血供较好、活力较强 的组织 n 按0.1ml/10g体重分别对裸鼠和KM小鼠腹腔注 射3.5%水合氯醛 。 n 待小鼠麻醉后，腹部朝上固定于小鼠固定板 上。 n 以3%碘酒棉球和75%酒精棉球对KM小鼠进行皮 肤消毒；同时，对裸鼠腋部进行消毒。 n 用直头剪刀于KM小鼠生殖口上端切一小口， 沿腹部两侧作弧型切开，直至胸膈肌根部。 小鼠的抓取和固定 n 观察膈肌形状后，于两侧根部分别切一 小口，将膈肌横向切开，绞断肋骨，直 至锁骨，然后掀起胸骨，暴露整个胸腔。 n 直视心脏，在心脏的上部，主动脉弓处， 有两片乳白色蝴蝶状的小片，即为胸腺。 n 用圆头镊将肠道拨向对侧，暴露肾脏。 n 用眼科剪刀取下肾脏，剥去肾包膜，放 入盛有生理盐水的培养皿中。 n 用剪刀将肾脏分解为若干2×3mm组织小 块，取边缘整齐、色泽红润为佳。 n 将一小块肾组织放入套筒针内备用。 n 在离目标区域中心点1-2cm处，用眼科 小剪刀作一2-3mm切口。 n 用套筒针在切口处刺入皮下直至目标中 心区域，将组织块推入，并迅速拔出。 n 麻醉、解剖裸鼠，与KM鼠比较胸腺的区 别 n 裸鼠胸腺只剩残基，基本上看不到 解剖观察 n 完成实验指导上第13、16页二份实验报 告 n 在实验报告的实验结果一项中完成小鼠 解剖图