2015-2016学年苏教版选修三关注基因工程学案.docVIP

学习目标1、说出基因工程的概念（A）2、简述基因工程的诞生历程（A）3、说出DNA重组技术所需的三种基因工具的作用（A）4、简述基因工程基本操作程序的四个步骤（B）一、基因工程的诞生和发展： 基因工程的诞生和发展经历了三个时期：1973—1976年为 ，1977—1981年为 ，1982年以后为 。 1973年，美国科学家 等将两种不同来源的DNA分子进行体外重组，并首次实现了在大肠杆菌中的表达，创立了 的新技术———基因工程。 二、基因工程的概念：是指在 通过 等方法，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入 并使重组基因在受体细胞中表达，产生人类所需的 的技术。因此，基因工程又称为 。 ⑴操作环境： ； ⑵操作对象： ； ⑶操作水平： ； ⑷基本过程：剪切→拼接→导入→表达；⑸结果：人类需要的基因产物。 三、基因工程的工具及作用 ㈠限制性核酸内切酶（简称限制酶）——“ ” 1、来源：主要是从 生物中分离纯化出来的。 2、作用：能够识别双链DNA分子的 ，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 3、特点:具有专一性，表现在两个方面： ①识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列。②切割特定序列中的特定位点。 4、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 末端和 末端。 [来源:学科网ZXXK] 例1、下列有关基因工程中限制内切酶的描述，错误的是（ ） A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列； B．限制性内切酶的活性受温度的影响； C．限制性内切酶能别和切割RNA；D．限制性内切酶可从原核生物中提取。 思考：限制性核酸内切酶的本质是什么？限制酶与解旋酶有什么区别？（它的本质是蛋白质，它也具有高效性、专一性、温和性等酶的基本特点。限制酶主要作用于两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而解旋酶主要作用于碱基对之间的氢键） ㈡DNA连接酶——“ ” 1、分类：根据酶的来源不同，可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类 2、作用：恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的 。 【阅读】▲两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：[来源:Zxxk.Com] ⑴相同点：都缝合磷酸二酯键 ⑵区别：E．coIiDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能使黏性末端之间连接；T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低。 ▲DNA连接酶与DNA聚合酶作用的比较 DNA连接酶DNA聚合酶不同点[][来源:Zxxk.Com]连接的DNA[双链][来源:学科网][来源:学科网]单链模板不要模板要模板连接的对象2个DNA片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上相同点作用实质形成磷酸二酯键化学本质蛋白质㈢载体——“ ” 1、载体的作用： 。 2、载体必须具备三个条件：⑴能在受体细胞中复制并稳定保存。⑵具有一至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入。⑶具有某些标记基因，以便进行筛选。 3、载体的种类：质粒 、 和 等。 最早应用最常应用的载体是质粒，它是细菌细胞中的一种很小的 。 四、基因工程的基本过程 ㈠获得目的基因（目的基因的获取） 1、获取方法主要有三种：⑴从自然界中已有的物种中分离出来，如可从基因文库中获取。⑵用人工的方法合成。⑶利用 扩增目的基因。 （1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 （2）目的：获取大量的目的基因 （3）原理：DNA双链复制 （4）过程：第一步：加热至90～95℃ DNA解链为单链； 第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 （5）特点：指