百日咳毒素单克隆抗体的制备及其ELISA定量检测方法的建立.pdfVIP

微生物学免疫学进展 ????年第 ??卷第 ?期 ???????????????????????? ???．????，???．??，??．?? · ?? ·? · 论 著 ·? 百 日咳毒素单克隆抗体 的制备及其 ?????定量? 检 测 方 法 的建 立? 詹 骞 ，刘 志飞 ，彭祥 兵 ，宁 浩然 ，陈雯 ，张爱 华 ，杨晓 明? ?武汉生物制 品研究所有 限责任公 司 ，武汉 ???????? 摘 要 ：目的 制备百 日咳毒素 ????????????????，???的单 克隆抗 体 ，并 建立双抗 体夹心 ?????用于检 测 ??的含量 。? 方 法? 采用杂交瘤技术 制备 ??的单抗 ，并对其 进行鉴定 ；优 化 ?????系统 反应条 件 ，建 立 ??双抗体 夹心 ?????? 定量检测方法 ，并对其进行精密性及准确性验证 ；应用建立 的方法检测武汉生物制品研 究所 有限责任公 司?简称武? 汉公司 ???批无 细胞百 ??咳疫 苗生产中间样品 中的 ??含 量。结果 获得 ?株稳定 的抗 ??杂交瘤细胞株 ，抗体亚? 型均为 ????，抗体腹水 ?????效 价达 ?：??。以上 ，均能与 ??发生特异 反应 ，而与百 日咳丝 状血凝素 、白喉和破伤? 风类毒素未发生交叉反应 ；建 立的双抗体夹 心 ?????的线性检测 范围在 ?．??～??．?????／??之 间 ，酶标板 内和板? 间变异系数均小于 ??％ ；??的高 、中 、低浓度 的回收率分别为 ??．??％ 、???．??％和 ??．??％ ；??批无 细胞百 日咳疫? 苗生产中间样品